Anticuerpo Monoclonal Anti-NCK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P16333

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NCK1

• NCK1 es una proteína adaptadora SH2/SH3, también conocida como NCK, nck-1 o NCKalfa, codificada por el gen NCK1; el empalme alternativo produce múltiples isoformas.
• Se asocia con receptores de factores de crecimiento fosforilados en tirosina (por ejemplo, KDR, PDGFRB) y sus sustratos, vinculando la activación del receptor con cascadas de señalización aguas abajo.
• NCK1 mantiene niveles bajos de fosforilación de EIF2S1 al promover su desfosforilación por la proteína fosfatasa 1 (PP1), regulando así la iniciación de la traducción.
• Participa en la respuesta al daño del ADN, facilitando la activación eficiente de efectores aguas abajo como CHEK2, posterior a los sensores de daño ATM/ATR.
• La proteína modula la activación de EIF2AK2/PKR por ARN de doble cadena, influyendo en la respuesta integrada al estrés.
• NCK1 interactúa con receptores de efrina, contribuyendo potencialmente a los procesos de adhesión y migración celular.
• La localización subcelular incluye el citoplasma, el retículo endoplásmico y el núcleo, consistente con sus funciones en la transducción de señales y la expresión génica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, que pueden modular sus interacciones y funciones; la proteína tiene un peso molecular calculado de ~43kDa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de los aminoácidos 200-300 del NCK1 humano; considere usar un control positivo que exprese la proteína NCK1 de longitud completa para la validación.
• Para Western blot, detecte una banda de aproximadamente 43kDa en lisados de líneas celulares humanas, de ratón o de rata; valide la especificidad con bloqueo de péptido o controles de knockdown/knockout.
• En inmunohistoquímica (secciones incluidas en parafina), puede ser necesario el recuperación antigénica; optimice las condiciones de tinción para cada tipo de tejido.
• Para inmunofluorescencia/ICC, las condiciones de fijación y permeabilización deben optimizarse para preservar la accesibilidad del epítopo y la arquitectura celular.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse de la combinación con un anticuerpo de detección adecuado; considere titulaciones en tablero de ajedrez para una relación señal-ruido óptima.

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