Anticuerpo policlonal de conejo anti-NCKAP1 para WB, ELISA - Q9Y2A7

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de NCKAP1

• La proteína 1 asociada a Nck (NCKAP1), también denominada HEM2, NAP1, NAP125 o p125Nap1, es una proteína de 128,8 kDa codificada por el gen NCKAP1 en humanos.
• NCKAP1 es un componente central del complejo regulador WAVE, que promueve la formación de lamelipodios al regular la reorganización de los filamentos de actina mediante el complejo Arp2/3, un proceso activado por la pequeña GTPasa RAC1.
• Dentro del complejo WAVE1, NCKAP1 es necesario para el tráfico endocítico inducido por el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) y para la señalización desde los endosomas tempranos a través del receptor NTRK2.
• La proteína se localiza en la membrana celular y se encuentra enriquecida en la membrana del lamelipodio, lo que concuerda con su función en la motilidad celular.
• NCKAP1 se expresa ampliamente en los tejidos humanos, con los niveles más altos en el cerebro, el corazón y el músculo esquelético; está notablemente ausente en los leucocitos de sangre periférica. En el cerebro, NCKAP1 se encuentra en las células de Purkinje, el núcleo dentado del cerebelo, la región CA4 y el giro dentado del hipocampo, así como en la sustancia gris y blanca frontal. Referencias relacionadas: PMID:28940097
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la acetilación, y el corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas. Las palabras clave de UniProt también destacan una hélice transmembrana y posibles interacciones entre el hospedador y los virus.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región N-terminal (aa 1-250) de NCKAP1 humano; la reactividad cruzada con ratón y rata sugiere conservación de los epítopos, pero se recomienda validar el producto en cada especie.
• Para la transferencia Western, el peso molecular previsto es de aproximadamente 129 kDa; considere utilizar un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje y tiempos de transferencia prolongados para garantizar una transferencia eficiente de esta proteína de alto peso molecular.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la titulación del anticuerpo y la optimización de las concentraciones del antígeno de recubrimiento; el rendimiento debe confirmarse utilizando proteína NCKAP1 recombinante o lisados celulares.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar; se recomienda incorporar controles positivos y negativos adecuados para obtener resultados reproducibles.

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