Anticuerpo policlonal de conejo Anti-NDST1 para WB, ELISA - P52848

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de NDST1

• NDST1 es la enzima bifuncional esencial que inicia la modificación del heparán sulfato al catalizar secuencialmente la N-desacetilación y N-sulfatación de residuos de glucosamina, produciendo el heparosano N-sulfatado necesario para la biosíntesis posterior de heparina y heparán sulfato. Referencias relacionadas: PMID:35137078, PMID:9230113, PMID:9744796
• Esta etapa enzimática es limitante de velocidad y determina el patrón final de sulfatación del heparán sulfato, que a su vez define su capacidad de interactuar con proteínas como la L-selectina, participando así en la adhesión y el tráfico de células inflamatorias.
• La actividad de NDST1 es necesaria para la secreción exosomal de sindecano, SDCBP (sintenina) y CD63, lo que pone de relieve una función no canónica en la biogénesis o liberación de vesículas extracelulares. Referencias relacionadas: PMID:22660413
• Una isoforma empalmada alternativa (isoforma 2) carece de ambas actividades catalíticas y funciona como regulador dominante negativo, potencialmente al alterar la estequiometría de los complejos de enzimas biosintéticos.
• Subcelularmente, NDST1 es una proteína integral de membrana del aparato de Golgi, con localización dual en las membranas del cis-Golgi y la red trans-Golgi.
• La proteína se expresa de forma generalizada en todos los tejidos, pero es particularmente abundante en corazón, hígado y páncreas, lo que coincide con los sistemas orgánicos que requieren una biosíntesis extensa de heparán sulfato.
• NDST1 sufre procesos de glicosilación y formación de enlaces disulfuro; las mutaciones en el gen NDST1 se asocian a discapacidad intelectual, lo que pone de manifiesto su papel fundamental en el desarrollo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 40–170) abarca la región N-terminal compartida por la isoforma 1 y la isoforma dominante negativa 2; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer ambas variantes de empalamiento y debe validarse en el sistema de muestra correspondiente.
• En transferencia Western, la proteína NDST1 madura migra con un peso molecular aparente de ~101 kDa; los desplazamientos de banda o la aparición de múltiples bandas pueden deberse a glicosilación o complejos unidos por enlaces disulfuro, por lo que se recomienda el uso de condiciones reductoras y controles positivos adecuados.
• Para ELISA, este anticuerpo policlonal puede actuar como reactivo de captura o detección; los usuarios finales deben realizar titulaciones en tablero con su antígeno diana específico (proteína recombinante o lisado celular) para optimizar el rendimiento.
• Dado que se informa de reactividad cruzada con NDST1 de ratón, el anticuerpo es adecuado para estudios en ratón; no obstante, confirme la conservación del epítopo mediante alineamiento de secuencias y experimentos piloto en muestras derivadas de ratón.

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