Anticuerpo policlonal anti-NEDD4 para WB, IHC-P, ELISA - P46934

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de NEDD4

• NEDD4 (proteína 4 expresada en células precursoras neuronales y regulada negativamente durante el desarrollo) también se conoce como RPF1, NEDD4-1 y proteína 53 inductora de la proliferación celular. Es una ligasa E3 de ubiquitina de tipo HECT que desempeña funciones fundamentales en la degradación de proteínas, la señalización de receptores y la autofagia.
• Como ligasa E3 de ubiquitina, NEDD4 acepta ubiquitina de las enzimas E2 y transfiere específicamente la ubiquitina a la lisina-63 de los sustratos diana, formando cadenas de poliubiquitina. Referencias relacionadas: PMID:19920177, PMID:21399620, PMID:23644597
• NEDD4 ubiquitina una amplia variedad de sustratos, incluidos receptores de factores de crecimiento (IGF1R, FGFR1, EGFR), proteínas de señalización (RAPGEF2, TNK2, BRAT1, DAZAP2) y componentes de la maquinaria transcripcional (POLR2A), dirigiendo a muchos de ellos a la internalización y a la degradación lisosomal o proteasómica. Referencias relacionadas: PMID:21765395, PMID:11598133, PMID:20086093, PMID:25631046, PMID:11342538, PMID:19920177
• El papel de NEDD4 en la regulación de la estabilidad de PTEN mediante poliubiquitinación ha sido objeto de debate; algunos estudios sugieren una relación directa, mientras que otros la cuestionan. Referencias relacionadas: PMID:18562292, PMID:17218260
• NEDD4 actúa como plataforma para reclutar USP13, formando un complejo de desubiquitinación que escinde las cadenas de ubiquitina unidas a Lys-48 de VPS34, estabiliza VPS34 y promueve la formación de autofagosomas. Referencias relacionadas: PMID:32101753
• Durante la infección viral, NEDD4 ubiquitina la proteína VP40 del virus del Ébola, contribuyendo a la gemación viral.
• NEDD4 se localiza en el citoplasma, el núcleo y la membrana celular, y experimenta modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación y la fosforilación.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 160-460, una región central de NEDD4 humano, lo que sugiere que el anticuerpo puede reconocer múltiples isoformas o dominios funcionales; se recomienda la validación en el sistema de muestra previsto.
• Para la transferencia Western, el peso molecular previsto es de aproximadamente 149 kDa; considere utilizar un gel de menor porcentaje (por ejemplo, 6-8 %) y tiempos de transferencia prolongados para garantizar una transferencia eficiente de proteínas de alto peso molecular.
• En inmunohistoquímica (tejidos incluidos en parafina), puede ser necesario optimizar las condiciones de recuperación antigénica; incluya controles positivos y negativos adecuados para confirmar la especificidad.
• Para ELISA, la naturaleza policlonal puede proporcionar una alta avidez; evalúe el rendimiento tanto como anticuerpo de captura como de detección y valide frente a estándares recombinantes pertinentes.

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