Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-NEK7 para WB, ELISA - Q8TDX7

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NEK7

• NEK7 (quinasa relacionada con NIMA 7) es una serina/treonina-proteína quinasa que juega un papel esencial en la progresión del ciclo celular mitótico, incluyendo la nucleación de microtúbulos del centrosoma, la formación del huso mitótico y la citocinesis.

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• Fosforila dianas posteriores como EML4 en Ser-146, promoviendo su disociación de los microtúbulos para una congresión cromosómica eficiente, y RPS6KB1.

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• Más allá de la mitosis, NEK7 sirve como un activador crítico del inflamasoma NLRP3, desbloqueando NLRP3 en el centro organizador de microtúbulos (MTOC) y permitiendo la activación de CASP1 independientemente de su actividad quinasa.

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• La interacción de NEK7 con NEK9 impone exclusividad mutua entre la activación del inflamasoma y la división celular, actuando como un interruptor celular.

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• Subcelularmente, NEK7 se localiza en el núcleo, citoplasma, polos del huso, centrosomas y MTOC.

• Se expresa altamente en pulmón, músculo, testículo, cerebro, corazón, hígado, leucocitos y bazo, con menor expresión en ovario, próstata y riñón; ausente en intestino delgado.

• Características estructurales y regulatorias clave incluyen un dominio quinasa de unión a ATP, sitios de unión a metales y modificaciones postraduccionales como acetilación y fosforilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre una región conservada (aa 203-302) de NEK7 humano; se espera detectar la proteína endógena de ~35 kDa en WB con muestras de humano, ratón y rata debido a la alta homología de secuencia.
• Para WB, considere usar lisados de células completas de líneas celulares comúnmente disponibles (p. ej., HeLa, HEK293T, Jurkat) como controles positivos y valide con muestras de knockdown o knockout específicas para confirmar la identidad de la banda.
• Para ELISA, se puede usar proteína o péptido recombinante de NEK7 como antígeno de recubrimiento; titula el anticuerpo para determinar la concentración de trabajo óptima en tu sistema de ensayo.
• Al estudiar vías relacionadas con el inflamasoma, incluye tratamientos de activación apropiados (p. ej., priming con LPS + nigericina) para evaluar el papel de NEK7; ten en cuenta que su función en la activación de NLRP3 es independiente de la quinasa.
• Dada su localización nuclear y citoplasmática, se puede emplear fraccionamiento subcelular para enriquecer compartimentos específicos antes de la detección.

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