Anticuerpo Monoclonal Anti-Neurofilamento L para WB, IF, IHC, ELISA - P07196

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del Polipéptido Ligero del Neurofilamento

• El polipéptido ligero del neurofilamento (NEFL) es un miembro de la familia de filamentos intermedios y es una de las tres principales proteínas del neurofilamento que también incluyen NEFM y NEFH, las cuales juntas mantienen el calibre neuronal y la estructura axonal.
• NEFL coopera con otras proteínas de filamentos intermedios neuronales como la periferina (PRPH) y la alfa-internexina (INA) para formar las redes filamentosas esenciales para la integridad neuronal.
• La proteína se expresa predominantemente en los axones, localizándose en el citoplasma y el citoesqueleto de las células neuronales, y desempeña un papel crítico en el crecimiento radial de los axones.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, glicación, metilación, fosforilación y ubiquitinación, que regulan el ensamblaje del filamento, su estabilidad y las interacciones con otros componentes del citoesqueleto.
• Las mutaciones en el gen NEFL están relacionadas con trastornos neurodegenerativos, incluidas las enfermedades de Charcot-Marie-Tooth tipos 1F y 2E, lo que destaca su papel en el mantenimiento axonal y la susceptibilidad a la neuropatía.
• La proteína tiene un peso molecular de aproximadamente 61,5 kDa (calculado a partir de la secuencia) y a menudo se detecta como una banda de 68 kDa mediante SDS-PAGE debido a modificaciones postraduccionales.
• NEFL, junto con otras subunidades del neurofilamento, sirve como biomarcador de daño neuronal en afecciones como la esclerosis múltiple, la enfermedad de Alzheimer y las lesiones cerebrales traumáticas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a los aminoácidos 60-250, una región central de la proteína NEFL humana, es probable que el anticuerpo reconozca un epítopo conservado; considere la alineación de secuencias al usarlo para especies no humanas para confirmar la reactividad.
• Para Western blot, puede observarse una banda cerca de los 68 kDa; valídelo comparando con el peso molecular esperado y utilizando controles de carga apropiados como β-actina o GAPDH.
• En inmunofluorescencia, se deben probar condiciones óptimas de fijación y permeabilización; la fijación con paraformaldehído seguida de permeabilización con Triton X-100 se usa comúnmente para la tinción de neurofilamentos.
• Para inmunohistoquímica, los métodos de recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato mediado por calor) pueden mejorar la detección; incluya controles de tejido positivo y negativo.
• Al usar el anticuerpo en ELISA, asegúrese de que el antígeno de recubrimiento coincida con la región del inmunógeno para evitar reactividad cruzada con otras subunidades del neurofilamento.

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