Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Neuropilina-1 (NRP1) para WB, ELISA - O14786

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Neuropilina-1

• La Neuropilina-1 (NRP1) es un receptor multifuncional de superficie celular también conocido como receptor del factor de crecimiento del endotelio vascular 165, CD304 y BDCA4. El empalme alternativo produce isoformas con patrones de expresión no superpuestos, lo que contribuye a sus diversas funciones específicas de tejido.
• Se une a semaforinas de clase 3 (p. ej., SEMA3A) y miembros de la familia VEGF (VEGF165, PLGF-2, VEGFB), mediando quimiorrepulsión y angiogénesis, respectivamente. Referencias relacionadas: PMID:10688880, PMID:9288753, PMID:9529250
• NRP1 reconoce un motivo de regla del extremo C (CendR) (R/KXXR/K) en los ligandos, desencadenando la internalización celular y la fuga vascular. Referencias relacionadas: PMID:19805273
• La coexpresión con VEGFR2/KDR mejora la unión de VEGF165 y la señalización descendente, promoviendo la quimiotaxis de células endoteliales y la angiogénesis.
• En el sistema nervioso en desarrollo, NRP1 guía la proyección del axón de las neuronas motoras y la migración del cuerpo celular, incluida la migración de las neuronas motoras faciales desde el rombómero 4 al 6.
• NRP1 se localiza en la membrana celular, el citoplasma, y también se encuentra secretada y asociada a la membrana mitocondrial, lo que refleja sus roles multifuncionales.
• En tejidos adultos, NRP1 se expresa altamente en corazón y placenta, moderadamente en pulmón, hígado, músculo esquelético, riñón y páncreas, y baja en cerebro. Referencias relacionadas: PMID:10688880, PMID:9529250

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 824–923 dentro del dominio C-terminal de la NRP1 humana. Esta región está conservada en ratón y rata, lo que es consistente con la reactividad cruzada reportada. Verifique la alineación de secuencias en su especie de interés antes de los experimentos.
• Para el análisis de transferencia Western (WB), se espera una banda cerca de 103 kDa para NRP1 de longitud completa. Considere el uso de protocolos de extracción de proteínas de membrana y condiciones reductoras, ya que NRP1 forma dímeros unidos por puentes disulfuro y puede presentar estructuras de orden superior. Valide la especificidad con controles apropiados (p. ej., competición con péptido o knockdown).
• Para ELISA, este anticuerpo puede ser adecuado como reactivo de captura o detección; titre las condiciones utilizando NRP1 recombinante o muestras positivas conocidas e incluya controles negativos para establecer la sensibilidad y el rango dinámico del ensayo.
• Pueden aparecer bandas adicionales debido a la heterogeneidad de isoformas, glicosilación o modificaciones de proteoglicanos; confirme la identidad de la banda utilizando espectrometría de masas o reactivos específicos de isoforma si es necesario.
• Almacene a -20°C o menos a su llegada y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener el rendimiento.

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