Anticuerpo Monoclonal Anti-NF-κB2 para WB, IHC-P, ELISA - Q00653

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NF-κB2

• NF-κB2 codifica la subunidad p100, que sufre procesamiento proteolítico para generar la subunidad activa p52 de unión al ADN; la isoforma p49 también se produce por empalme alternativo.
• p100/p52 pertenece a la familia de factores de transcripción NF-kappa-B, formando homodímeros o heterodímeros con proteínas similares a Rel (RELA, RELB, REL, NFKB1) para regular la expresión génica.
• En la vía no canónica de NF-kappa-B, la p100 asociada a RelB se fosforila por IKKα y se procesa a p52, lo que conduce a la translocación nuclear del complejo activador transcripcional RelB-p52.
• Los homodímeros de p52 actúan como represores transcripcionales, mientras que los heterodímeros RelB-p52 activan la transcripción, uniéndose a sitios kappa-B (5'-GGRNNYYCC-3') en promotores de genes inmunitarios e inflamatorios.
• NF-κB2 participa en una amplia gama de procesos biológicos que incluyen la inflamación, la inmunidad, el crecimiento celular, la diferenciación y la apoptosis.
• En conjunto con RELB, NF-κB2 regula el reloj circadiano al reprimir la actividad activadora transcripcional del heterodímero CLOCK-BMAL1.
• La localización subcelular es tanto citoplásmica (como complejos inactivos p100/I-kappa-B) como nuclear (como dímeros activos que contienen p52).
• Las repeticiones Ank, el enlace isopéptido y la conjugación ubl (SUMOilación) son modificaciones postraduccionales, y la proteína también se encuentra fosforilada.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 745-877 dentro del dominio de repetición de anquirina C-terminal de p100, que está ausente en la subunidad procesada p52; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer preferentemente la p100 de longitud completa (~97 kDa). Se recomienda validar la reactividad contra tanto p100 como p52 en su sistema modelo si es necesario.
• Para transferencia western, utilice condiciones estándar de SDS-PAGE y transferencia; se espera una banda cerca de 97 kDa para p100. Las bandas de menor tamaño pueden representar intermediarios de procesamiento o productos de degradación.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), se puede observar tinción nuclear y citoplásmica dependiendo del estado de activación de NF-κB2 en el tejido. Incluya controles adecuados para la especificidad de la señal.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede usar con p100 recombinante o lisados celulares; asegúrese de que el antígeno de recubrimiento contenga la región del epítopo C-terminal.
• La reactividad cruzada con ratón y rata sugiere conservación de la secuencia inmunógena entre estas especies, pero se recomienda una alineación de secuencias para confirmar la identidad del epítopo.

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