Anticuerpo Policlonado de Conejo Anti-NFIL3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q16649

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NFIL3

• NFIL3 (proteína regulada por el factor nuclear interleucina-3), también conocido como E4BP4, IL3BP1, NFIL3A o NF-IL3A, es un regulador transcripcional codificado por el gen NFIL3 en humanos (GeneID: 4783). Reconoce y se une a la secuencia 5'-[GA]TTA[CT]GTAA[CT]-3', presente en muchos promotores celulares y virales.
• Actúa como represor y activador transcripcional. Reprime la transcripción de promotores con sitios ATF y compite con factores de unión al ADN PAR (DBP, HLF, TEF) por el mismo sitio consenso. Activa la transcripción del promotor de la interleucina-3 en linfocitos T.
• NFIL3 es un componente central del reloj circadiano, que funciona como regulador negativo de la expresión de PER2, influyendo así en la oscilación circadiana.
• Subcelularmente se localiza en el núcleo, lo que coincide con su función como factor de transcripción. Se expresa en varios tejidos como vejiga, estómago, tiroides, médula espinal, nódulo linfático, tráquea, glándula suprarrenal, médula ósea y músculo.
• Se modifica postraduccionalmente por fosforilación y ubiquitinación (enlace isopéptido, conjugación Ubl), lo que puede regular su actividad y estabilidad.
• Desempeña un papel en el desarrollo de células inmunitarias; protege a las pro-células B de la apoptosis y es necesario para el desarrollo de precursores de células asesinas naturales.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 133-462 de NFIL3 humano, cubriendo una gran porción de la proteína. Esta región incluye el dominio de unión al ADN y probablemente motivos funcionales críticos, por lo que el anticuerpo es adecuado para detectar NFIL3 de longitud completa.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho es de 51 kDa. Utilice controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de tejidos con alta expresión de NFIL3 como nódulo linfático o médula ósea) y verifique la especificidad de la banda utilizando muestras de silenciamiento o knockout si están disponibles.
• Para inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), asegure una fijación y permeabilización adecuadas para acceder al NFIL3 nuclear. Incluya una contratinción nuclear para confirmar la localización.
• Para ELISA, considere emparejarlo con un anticuerpo secundario optimizado para la detección de policlonados de conejo. Valide las condiciones del ensayo utilizando proteína NFIL3 recombinante o lisados celulares.
• Dado que el anticuerpo tiene reactividad cruzada con NFIL3 de rata, se puede utilizar para estudios entre especies, pero siempre confirme la reactividad en su configuración experimental específica.

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