Anticuerpo policlonal de conejo anti-NG2/CSPG4 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q6UVK1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NG2/CSPG4

• NG2/CSPG4 es un condroitín sulfato proteoglicano, también conocido como condroitín sulfato proteoglicano de melanoma (MCSP), codificado por el gen CSPG4. Se trata de una proteína transmembrana de gran tamaño con un dominio extracelular que contiene cadenas de glicosaminoglicano de condroitín sulfato.
• Actúa como receptor de superficie celular para el colágeno alfa 2(VI) y diversos factores de crecimiento, modulando la proliferación celular, la migración y la morfogénesis microvascular. También inhibe el crecimiento de neuritas y el colapso del cono de crecimiento durante la regeneración axonal.
• Desempeña un papel fundamental en la invasión de células de melanoma al regular la degradación del colágeno tipo I dependiente de MPP16 y potenciar la activación del plasminógeno, al mismo tiempo que inhibe la angiostatina, promoviendo así la remodelación tisular y la angiogénesis.
• Actúa como transductor de señales a través de su extremo C citoplasmático, interactuando con proteínas de andamiaje y señalización para promover la formación de fibras de retracción, la polarización celular y la adhesión mediada por integrinas a través de las vías Rho GTPasa, CDC42, ACK1 y BCAR1.
• Activa las cascadas de señalización FAK y ERK1/ERK2, contribuyendo a la extensión y migración celular.
• Se localiza principalmente en la membrana celular, incluyendo la membrana celular apical, la membrana del lamelipodio y las proyecciones de la superficie celular.
• Se detecta a nivel de proteína en fibroblastos, placenta y células de melanoma maligno, lo que pone de relieve su importancia en la progresión cancerosa y los procesos del desarrollo.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, formación de enlaces disulfuro y glicosilación N-ligada. Cuenta con una hélice transmembrana y un péptido señal, por lo que se clasifica como un proteoglicano transmembrana de tipo I.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 1950–2210) se encuentra en el dominio citoplasmático; por lo tanto, el anticuerpo puede detectar tanto las formas completas como las truncadas de CSPG4 en western blotting.
• Debido al alto peso molecular (~251 kDa), se recomienda utilizar un gel de SDS-PAGE de bajo porcentaje (por ejemplo, 6%) y tiempos de transferencia prolongados para obtener resultados óptimos en WB.
• Para IHC-P, puede ser necesaria la recuperación de antígeno por inducción de calor para exponer el epitopo en tejidos fijados en formalina y embebidos en parafina.
• En IF/ICC, los pasos de permeabilización son esenciales para permitir que el anticuerpo acceda al epitopo intracelular.
• La reactividad cruzada confirmada con ratón permite estudios comparativos, pero se recomienda la validación en el sistema de muestra específico debido a posibles diferencias dependientes de la especie.
• Al diseñar ensayos de ELISA, el emparejamiento de este anticuerpo con un anticuerpo de captura dirigido a un epitopo extracelular puede generar inmunoensayos sándwich eficaces.

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