Anticuerpo monoclonal de conejo anti-NLK para WB, IHC-P, ELISA - Q9UBE8

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NLK

• NLK (Nemo-like kinase) es una serina/treonina-proteína quinasa y miembro de la familia de quinasas, también conocida como LAK1. Contiene sitios de unión a ATP y metales típicos de las quinasas de proteínas.
• En la vía Wnt no canónica, NLK actúa como un efector positivo aguas abajo de WNT5A, TAK1 e HIPK2, influyendo en la determinación del destino celular. Referencias relacionadas: PMID:15004007, PMID:15764709
• NLK regula negativamente la señalización canónica de Wnt/β-catenina al fosforilar TCF7L2/TCF4 y LEF1, lo que resulta en la disociación del ADN y la proteólisis de LEF1, suprimiendo así la expresión de genes diana de Wnt. Referencias relacionadas: PMID:12482967, PMID:21454679
• Funciona como un regulador negativo de la señalización de Notch a través de la fosforilación de NOTCH1, bloqueando el ensamblaje del complejo ternario transcripcionalmente activo. Referencias relacionadas: PMID:20118921
• NLK fosforila y desestabiliza los factores de transcripción de la familia MYB (MYB, MYBL1, MYBL2), inhibiendo su actividad transcripcional ya sea promoviendo la proteólisis o interrumpiendo la unión del coactivador. Referencias relacionadas: PMID:15082531
• En la señalización de IL6/IL1B, NLK fosforila STAT3 y coopera con ATF5 para mejorar la actividad transcripcional de C/EBP, al mismo tiempo que estabiliza los niveles de proteína ATF5. Referencias relacionadas: PMID:15004007, PMID:15764709, PMID:25512613
• Bajo estrés osmótico, NLK fosforila RPTOR, inhibiendo el reclutamiento lisosomal de mTORC1 y la señalización aguas abajo. Referencias relacionadas: PMID:26588989
• NLK se localiza tanto en el núcleo como en el citoplasma, donde modula la actividad de los factores de transcripción y la transducción de señales.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 400-500 de la NLK humana; esto puede proporcionar una alta especificidad en aplicaciones relevantes.
• Para Western blot, el peso molecular esperado es de aproximadamente 58 kDa; considere controles positivos y negativos apropiados (por ejemplo, líneas celulares que expresen NLK).
• Para inmunohistoquímica (parafina), la recuperación de antígeno y la optimización de la titulación del anticuerpo pueden mejorar la tinción; valide en tejidos conocidos por expresar NLK.
• El rendimiento de ELISA depende del formato del ensayo; considere configuraciones directas o indirectas con agentes de bloqueo adecuados.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo, es compatible con anticuerpos secundarios anti-IgG de conejo; minimice la reactividad cruzada con otras especies.
• Evite ciclos repetidos de congelación-descongelación; almacene de acuerdo con las recomendaciones del proveedor.

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