Anticuerpo Policlonal Anti-NLRC4 para WB - Q3UP24

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NLRC4

• NLRC4 (proteína que contiene el dominio CARD de la familia NLR 4) también se conoce como Ipaf, CARD12, CLAN y otros alias; es un componente clave de los inflamasomas que impulsan las respuestas inmunitarias innatas contra patógenos intracelulares.
• La proteína actúa como un sensor que ensambla el complejo del inflamasoma NLRC4 tras el reconocimiento indirecto de componentes bacterianos y fúngicos, lo que conduce a la activación de la caspasa-1, la producción de citoquinas proinflamatorias (p. ej., IL-1β) y la piroptosis de macrófagos.
• NLRC4 funciona en cooperación con las proteínas de la familia NAIP (NAIP1, NAIP2, NAIP5), que se unen directamente a ligandos específicos derivados de patógenos como la flagelina, proteínas de la varilla del T3SS (p. ej., PrgJ) y proteínas de la aguja del T3SS, desencadenando así el ensamblaje del inflamasoma NLRC4.
• El inflamasoma NLRC4 es crítico para la defensa del huésped contra bacterias gramnegativas como Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Legionella pneumophila y Pseudomonas aeruginosa, así como contra el patógeno fúngico Candida albicans.
• En la mucosa intestinal, NLRC4 distingue entre bacterias comensales y patógenas, provocando la secreción protectora de IL-1β específicamente en respuesta a patógenos como Salmonella o P. aeruginosa.
• A nivel subcelular, NLRC4 se localiza en el citosol y puede formar focos de inflamasomas (specks) tras la activación.
• Expresión tisular: NLRC4 es expresado por fagocitos mononucleares intestinales, lo que subraya su papel en la inmunidad de las mucosas.
• La proteína presenta un dominio de repeticiones ricas en leucina en el extremo C-terminal (LRR), un dominio central de unión a nucleótidos (NBD/NACHT) con actividad de unión a ATP y un dominio CARD en el extremo N-terminal; sufre fosforilación durante la activación del inflamasoma.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado para este anticuerpo policlonal corresponde a los aminoácidos 71-170 del NLRC4 de ratón. Esta región se encuentra dentro del dominio N-terminal, lo que puede proporcionar reactividad cruzada con ortólogos humanos y de rata debido a la conservación de la secuencia. Valide la reactividad cruzada en su configuración experimental específica.
• El peso molecular predicho de NLRC4 es de aproximadamente 116 kDa. Para la transferencia Western (Western blotting), considere el uso de un gel con un porcentaje adecuado y condiciones de transferencia, e incluya controles positivos como líneas celulares de macrófagos (p. ej., J774, RAW 264.7) estimuladas para inducir la expresión de NLRC4.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia (IF) o IF-P, NLRC4 es típicamente citosólico en condiciones de estado estacionario, pero puede formar focos puntuales de inflamasomas (specks) tras la estimulación. La tinción simultánea con ASC o caspasa-1 puede ayudar a visualizar los inflamasomas activados.
• Para aplicaciones de ELISA, este anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o detección después de la validación de emparejamiento adecuada. Titule y pruebe en sus condiciones de ensayo.

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