Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-NLRC4 para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9NPP4

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NLRC4

• NLRC4 (proteína 4 que contiene el dominio CARD de la familia NLR) es un miembro de la familia de proteínas NLR, caracterizada por un dominio CARD N-terminal, un dominio NACHT central y repeticiones ricas en leucina (LRR) C-terminales.
• Actúa como un componente clave del inflamasoma que detecta indirectamente proteínas de bacterias y hongos patógenos, ensamblando un complejo inflamasoma para promover la activación de caspasa-1, la producción de citoquinas y la piroptosis de macrófagos. Referencias relacionadas: PMID:15107016
• Tras la activación, el inflamasoma NLRC4 impulsa la maduración dependiente de caspasa-1 y la liberación de las citoquinas proinflamatorias IL-1β e IL-18.
• NLRC4 se localiza predominantemente en el citoplasma y el citosol, y al detectar ligandos bacterianos, se oligomeriza en el complejo inflamasoma.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas: la isoforma 1 se expresa abundantemente en pulmón, leucocitos, ganglio linfático y colon; la isoforma 2 se expresa de forma ubicua con enriquecimiento en pulmón y bazo; la isoforma 4 es específica del cerebro.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen fosforilación, acorde con su regulación en la señalización inmune innata.
• Las mutaciones en NLRC4 están vinculadas a síndromes autoinflamatorios como el síndrome autoinflamatorio familiar por frío 4 (FCAS4) y la autoinflamación con enterocolitis infantil (AIFEC).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 85-170 de NLRC4 humano; verifique la homología de secuencia en ratón y rata para asegurar la reactividad cruzada esperada.
• Para Western blot, NLRC4 migra a ~116 kDa; incluya controles positivos (por ejemplo, lisados de macrófagos estimulados con LPS) y optimice las condiciones de transferencia para proteínas de alto peso molecular.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, NLRC4 muestra tinción citoplasmática, pero la activación del inflamasoma induce agregados puntiformes; considere tratar las células con componentes bacterianos o flagelina para visualizar esta relocalización.
• Para ELISA, valore el anticuerpo y la proteína recombinante para establecer concentraciones de trabajo óptimas, y utilice un par de anticuerpos emparejado si está disponible.
• Este anticuerpo policlonal puede detectar múltiples isoformas; confirme la identidad de las bandas por espectrometría de masas o sondas específicas de isoforma si es necesario.

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