Anticuerpo policlonal de conejo anti-NLRP3 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96P20

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NLRP3

• NLRP3 actúa como componente sensor del inflamasoma NLRP3, iniciando el ensamblaje del complejo con PYCARD/ASC y CASP1, lo que conduce a la escisión mediada por caspasa-1 y la secreción de las citocinas proinflamatorias IL1B e IL18, así como a la piroptosis inducida por GSDMD.
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• La activación del inflamasoma también desencadena la liberación extracelular de HMGB1, amplificando las respuestas inflamatorias.
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• En condiciones de reposo, NLRP3 se mantiene en un estado autoinhibido mediante la unión a ADP.
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• Una amplia gama de señales de peligro pueden activar a NLRP3, entre ellas ATP extracelular, nigericina, especies reactivas del oxígeno, cristales de urato monosódico, cristales de colesterol, fibras de beta amiloide y partículas ambientales.
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• Tras la activación, NLRP3 se recluta al centro organizador de microtúbulos (MTOC) y luego a la membrana dispersa de la red trans-Golgi (dTGN), donde se une al fosfatidilinositol 4-fosfato y ensambla el inflamasoma activo.
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• NLRP3 presenta actividad ATPasa intrínseca.
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• Además de su papel en la formación del inflamasoma, NLRP3 puede funcionar como factor de transcripción, regulando la diferenciación de las células Th2 y la expresión de genes de citocinas (Por similitud).

• Subcelularmente, NLRP3 se localiza en el citosol, el inflamasoma, la membrana del aparato de Golgi, las mitocondrias, el retículo endoplásmico, el núcleo, y también puede ser secretado.

• La expresión tisular es prominente en macrófagos, células dendríticas, células B y T, y también se encuentra en células epiteliales pulmonares, condrocitos, epitelios escamosos estratificados y osteoblastos.
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Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre la región N-terminal (aa 1-220) que incluye el dominio PYRIN, lo que sugiere reactividad con la proteína NLRP3 de longitud completa.
• Para Western blot, el peso molecular calculado es de aproximadamente 118 kDa; utilice geles de acrilamida de bajo porcentaje y optimice las condiciones de transferencia para proteínas grandes.
• En IF/ICC, NLRP3 puede presentar patrones de tinción citoplasmática y puntiforme perinuclear; incluya controles adecuados y valide la dilución del anticuerpo primario.
• Este anticuerpo policlonal es aplicable para ELISA; al desarrollar ensayos sándwich, se recomienda una selección cuidadosa del emparejamiento con un anticuerpo de detección y debe evaluarse la reactividad cruzada.

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