Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-NNMT para WB, IF/ICC, ELISA - P40261

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NNMT

• NNMT es una metiltransferasa citoplasmática que cataliza la N-metilación de la nicotinamida, un paso clave en la eliminación de la vitamina B3 (nicotinamida), utilizando S-adenosil-L-metionina (SAM) como donador de metilo.
  Referencias relacionadas: PMID:21823666 PMID:23455543 PMID:8182091
• Al consumir SAM, NNMT regula el potencial de metilación celular y media las modificaciones epigenéticas, destacando la reducción de la marca represiva de histona H3K27me3, promoviendo así cambios transcripcionales globales.
  Referencias relacionadas: PMID:23455543 PMID:26571212 PMID:31043742
• NNMT contribuye al estado pluripotente de las células madre embrionarias al limitar los niveles de H3K27me3, característico del paisaje epigenético preimplantacional.
  Referencias relacionadas: PMID:26571212
• Como regulador metabólico, NNMT influye en el gasto energético del tejido adiposo blanco, la gluconeogénesis hepática y la biosíntesis de colesterol, en parte al afectar el flujo de poliaminas y las vías de recuperación de NAD+.
• NNMT puede N-metilar otros compuestos de piridina estructuralmente relacionados con la nicotinamida, lo que sugiere un papel en la desintoxicación de xenobióticos.
  Referencias relacionadas: PMID:30044909
• Se expresa predominantemente en el hígado, con niveles más bajos en riñón, pulmón, músculo esquelético, placenta y corazón; no se detecta en el cerebro ni en el páncreas.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y citrulinación, y la proteína es un miembro del proteoma de referencia bien caracterizado con evidencia de secuenciación directa.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es una proteína recombinante que cubre la secuencia completa de la NNMT humana (aa 1–264). Se espera que este diseño genere anticuerpos que reconocen la estructura nativa de la proteína; sin embargo, se recomienda una validación empírica para cada aplicación.
• Para Western blotting, se espera una banda alrededor de 30 kDa. Optimice la dilución del anticuerpo y las condiciones de detección utilizando controles positivos adecuados (por ejemplo, lisado de hígado) y considere la fraccionación subcelular para enriquecer proteínas citoplasmáticas.
• En inmunofluorescencia/ICC, NNMT es citoplasmática. Utilice protocolos adecuados de fijación y permeabilización para preservar los antígenos citoplasmáticos y valide con tejidos negativos conocidos (por ejemplo, cerebro).
• Para aplicaciones de ELISA, se pueden probar formatos directos o sándwich, con titulación cuidadosa del antígeno de recubrimiento y el anticuerpo. La reactividad cruzada con la NNMT de ratón y rata puede permitir el desarrollo de ensayos multiespecie, pero debe verificarse la homología de secuencia.
• No se proporcionan diluciones prevalidadas ni datos de rendimiento; cada sistema experimental requiere optimización individual.

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