Anticuerpo monoclonal de conejo anti-nNOS para WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P29475

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de nNOS

• nNOS (Sintasa de óxido nítrico 1) es una enzima constitutiva principalmente responsable de la producción de óxido nítrico (NO) en las neuronas, donde el NO actúa como neurotransmisor y mensajero retrógrado en el sistema nervioso.
• Más allá de la señalización neuronal, nNOS exhibe actividad peptidil-cisteína S-nitrosilasa, mediando la S-nitrosilación de cisteína de proteínas diana citoplasmáticas como SRR, contribuyendo así a la regulación postraduccional.
• Codificada por el gen NOS1, surgen múltiples isoformas mediante empalme alternativo; la isoforma 1 se expresa de manera ubicua (cerebro, músculo esquelético, testículo, pulmón, riñón), mientras que la isoforma 3 es específica del testículo y la isoforma 4 se detecta en testículo, músculo esquelético, pulmón y riñón.
• A nivel subcelular, nNOS se localiza en la membrana celular, incluyendo el sarcolema en las células musculares, y en las espinas dendríticas en las neuronas, posicionándola para una señalización precisa.
• La proteína es una flavoproteína que contiene grupo hemo que se une a la calmodulina, FAD, FMN, NADPH y hierro, requiriendo múltiples cofactores para su actividad de oxidorreductasa.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación y la ubiquitinación, que pueden regular su actividad, estabilidad o localización.
• Como enzima clave en la señalización del óxido nítrico, nNOS está implicada en la neurotransmisión, la plasticidad sináptica y la contractilidad muscular.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido C-terminal (aa 1335–1434), una región conservada entre humanos, ratones y ratas, consistente con la reactividad cruzada informada; considere la alineación de secuencias si se utiliza en otras especies.
• Para Western blot (WB), el alto peso molecular de nNOS (~161 kDa) puede requerir tiempos de transferencia extendidos y un porcentaje de gel optimizado; valide la detección en lisatos de tejidos o células relevantes.
• En aplicaciones de inmunofluorescencia (IF), anticipe la tinción en la membrana celular, el sarcolema o las espinas dendríticas; la tinción simultánea con marcadores específicos de compartimentos puede ayudar en la localización.
• Para ELISA, deberían ser aplicables los protocolos estándar basados en péptidos o proteínas; verifique la especificidad utilizando nNOS recombinante o un ensayo de bloqueo competitivo con péptidos si las señales no específicas son una preocupación.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo, ofrece una alta consistencia de lote a lote; no obstante, cada nuevo lote debe ser titulado en el sistema de ensayo previsto.

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