Anticuerpo Policlonal Anti-NOX2/gp91phox para WB, ELISA - P04839

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NOX2/gp91phox

• NOX2/gp91phox, también conocido como CYBB o oxidasa NADPH 2, es la subunidad catalítica de la cadena pesada del complejo citocromo b-245 de los fagocitos.
• Subunidad catalítica que media la transferencia de electrones desde el NADPH citosólico hacia el O2 para producir el anión superóxido, un precursor de las especies reactivas de oxígeno críticas para la muerte microbiana (PubMed:15338276, PubMed:36241643, PubMed:36413210). Referencias relacionadas: PMID:15338276 PMID:36241643 PMID:36413210
• La transferencia de electrones implica la reducción secuencial de FAD y dos cofactores de hemo para reducir el O2 (PubMed:38355798). Referencias relacionadas: PMID:38355798
• La activación requiere el ensamblaje de subunidades citosólicas (p. ej., p47-phox/NCF1) con el citocromo b-245 unido a membrana, desencadenado por fosforilación y translocación de membrana (PubMed:19028840, PubMed:38355798). Referencias relacionadas: PMID:19028840 PMID:38355798
• Se localiza principalmente en la membrana celular y la membrana fagosómica de los fagocitos.
• Se detecta en neutrófilos, donde desempeña un papel central en el estallido respiratorio.
• Las mutaciones en CYBB causan la enfermedad granulomatosa crónica ligada al X (CGD), caracterizada por una producción defectuosa de superóxido e infecciones recurrentes.
• Contiene dominios de unión a FAD y NADPH, dos grupos hemo y está N-glicosilado; regulado por fosforilación y ubiquitinación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 101-200 de NOX2/gp91phox humano; el anticuerpo policlonal resultante puede reconocer múltiples epítopos dentro de esta región. Se recomienda validar la especificidad utilizando controles positivos (p. ej., lisados de neutrófilos) y negativos.
• Para la transferencia Western (Western blotting), se espera una banda principal alrededor de 65 kDa para la forma no glicosilada; bandas adicionales con pesos moleculares más altos pueden corresponder a especies glicosiladas (gp91phox). Optimice las condiciones de bloqueo y detección en consecuencia.
• Se informa que el anticuerpo reacciona de forma cruzada con ratón y rata; sin embargo, debido a variaciones en la secuencia, confirme la reactividad en su sistema modelo específico.
• En aplicaciones de ELISA, considere ensayos de competición con péptidos para evaluar la especificidad.
• Dado que el objetivo es una proteína transmembranal, la inclusión de detergentes suaves en los tampones de lisis puede mejorar la solubilización.

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