Anticuerpo policlonal anti-NPC2 (HE1, EDDM1) para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P61916

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NPC2

• NPC2 (también conocido como HE1, EDDM1) es un transportador intracelular de colesterol que desempeña un papel fundamental en la salida del colesterol del compartimento lisosomal.
• Actúa en concierto con NPC1; el colesterol liberado de las LDL en los endosomas tardíos/lisosomas es transferido por NPC2 al bolsillo de unión al colesterol de NPC1.
  Referencias relacionadas:
  PMID:17018531 PMID:18772377 PMID:27238017
• NPC2 se une al colesterol con una estequiometría de 1:1 y también puede unirse a una variedad de otros esteroles, incluidos los esteroles vegetales.
  Referencias relacionadas:
  PMID:17018531
• La forma secretada de NPC2 regula la secreción biliar de colesterol a través de la estimulación del transporte mediado por ABCG5/ABCG8.
• Subcelularmente, NPC2 se encuentra en el lisosoma, el retículo endoplasmático y se secreta.
• Se detecta en múltiples tejidos, incluyendo bilis de la vesícula biliar, fibroblastos, riñón, hígado, bazo, intestino delgado, placenta, testículo y epidídimo.
• La proteína contiene un péptido señal y presenta modificaciones postraduccionales como puentes disulfuro, glicosilación y acetilación; las mutaciones en NPC2 están relacionadas con la enfermedad de Niemann-Pick tipo C2.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se produjo contra una proteína de fusión recombinante que abarca los aminoácidos 20-151 de NPC2 humano, lo que corresponde a la proteína madura completa después de la escisión del péptido señal. Este diseño puede garantizar el reconocimiento de NPC2 endógeno.
• Para el Western blot, prevea una banda de aproximadamente 17 kDa; valide el anticuerpo en lisados de control positivo (por ejemplo, fibroblastos humanos o tejido renal) y considere el uso de un agente reductor dada la presencia de puentes disulfuro.
• En las aplicaciones IHC-P o IF-P, incluya los pasos apropiados de recuperación de antígeno y verifique la tinción en cortes de tejido que se sabe que expresan NPC2 (como riñón o testículo).
• El anticuerpo reacciona de forma cruzada con NPC2 de ratón y rata; sin embargo, se debe verificar la homología de secuencia entre especies para epítopos específicos, y el anticuerpo debe validarse en el modelo experimental relevante.

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