Anticuerpo policlonal de conejo anti-NR1I3 para WB - Q14994

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de NR1I3

• NR1I3 codifica el receptor constitutivo de androstano (CAR), un miembro de la superfamilia de receptores nucleares; también se conoce como MB67 y activador constitutivo de la respuesta a retinoides.
• CAR funciona como un factor de transcripción activado por ligando que se une a elementos de respuesta al ácido retinoico (RARE), controlando así la expresión de genes como el receptor beta 2 del ácido retinoico y la alcohol deshidrogenasa 3.
• NR1I3 transactiva el módulo potenciador sensible al fenobarbital del gen humano CYP2B6 y el elemento de respuesta a xenobióticos de CYP3A4, desempeñando un papel central en el metabolismo y la desintoxicación de fármacos.
• El receptor contiene un dominio de unión al ADN con dos motivos de dedos de zinc y un dominio de unión al ligando, de acuerdo con sus actividades de unión al zinc y al ADN.
• A nivel subcelular, CAR se localiza predominantemente en el nucleoplasma, pero también se encuentra en el citoplasma y asociado con elementos del citoesqueleto, lo que refleja un tráfico intracelular dinámico.
• La expresión de NR1I3 es predominantemente hepática, con los niveles más altos de ARNm detectados en el tejido hepático.
• Las modificaciones postraduccionales, incluida la fosforilación, regulan la actividad y la localización subcelular de CAR, afectando su función transcripcional.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples variantes de transcritos, lo que potencialmente diversifica el repertorio funcional de NR1I3.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 103-352 de NR1I3 humano, abarcando los dominios bisagra y de unión al ligando; esta región está relativamente conservada, lo que respalda la reactividad cruzada esperada con los ortólogos de ratón y rata.
• Para la transferencia Western, se espera una banda de aproximadamente 40 kDa; considere utilizar lisados de células completas de tejido hepático o líneas celulares de hepatoma (p. ej., HepG2) para validar la expresión endógena.
• En inmunofluorescencia/ICC, NR1I3 puede mostrar tinción tanto nuclear como citoplasmática; los protocolos de fijación y permeabilización deben optimizarse para preservar las fracciones asociadas al citoesqueleto.
• Este anticuerpo policlonal de conejo es adecuado para la inmunoprecipitación (IP), pero la eficiencia de unión a los complejos nativos de CAR debe determinarse empíricamente en el contexto celular pertinente.
• Las aplicaciones de ELISA pueden beneficiarse del uso de proteína o péptido NR1I3 recombinante como antígeno de captura; las condiciones de dilución y detección requieren optimización por parte del usuario final.

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