Anticuerpo Policlonal Anti-NRF2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16236

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NRF2

• NRF2 (factor 2 relacionado con el eritroide nuclear, también conocido como NFE2L2) es un factor de transcripción codificado por el gen NFE2L2, con un peso molecular de ~68 kDa. Pertenece a la familia de cremallera de leucina de región básica cap 'n' collar (CNC-bZIP).
• NRF2 desempeña un papel central en la defensa celular contra el estrés oxidativo al unirse a los elementos de respuesta antioxidante (ARE) en las regiones promotoras de genes citoprotectores, incluidas las enzimas de desintoxicación de fase 2, neutralizando así los electrófilos reactivos. Referencias relacionadas: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• En condiciones basales, NRF2 es ubiquitinado y degradado rápidamente en el citoplasma por el complejo de ubiquitina ligasa E3 KEAP1-CUL3-RBX1. Tras estrés oxidativo o electrófilo, KEAP1 se inhibe, lo que permite que NRF2 se acumule, se transloca al núcleo, forme heterodímeros con proteínas Maf pequeñas y active la transcripción de genes diana. Referencias relacionadas: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201, PMID:19489739, PMID:29590092
• La autofagia selectiva también activa a NRF2: el receptor de autofagia SQSTM1/p62 interactúa con KEAP1, lo secuestra y conduce a la inactivación de KEAP1, promoviendo así la acumulación nuclear de NRF2 y la expresión de genes citoprotectores. Referencias relacionadas: PMID:20452972
• Durante la respuesta a proteínas desplegadas (UPR), NRF2 se activa, contribuyendo a la homeostasis redox y la supervivencia celular bajo estrés del retículo endoplásmico.
• NRF2 suprime la inflamación mediada por macrófagos al bloquear la transcripción de citoquinas proinflamatorias e inhibir el reclutamiento de ARN polimerasa II cerca de genes proinflamatorios, independientemente del motivo de unión canónico de NRF2 y los niveles de ROS.
• NRF2 limita la infección viral: reprime la detección citosólica de ADN antiviral al suprimir la expresión de STING1 e inhibe la replicación de varios virus patógenos (por ejemplo, SARS-CoV-2, HSV-1, Vaccinia, Zika) a través de un mecanismo independiente del interferón de tipo I. Referencias relacionadas: PMID:30158636, PMID:33009401
• NRF2 se expresa ampliamente, con los niveles más altos en músculo adulto, riñón, pulmón, hígado y músculo fetal. Se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, realizando un transporte dinámico en respuesta a señales celulares.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo policlonal se obtuvo contra una proteína recombinante correspondiente a los aminoácidos 366-605 de NRF2 humano, dirigiéndose a la región C-terminal. Puede detectar formas totales y modificadas; considere verificar la especificidad en su sistema experimental usando controles de silenciamiento o knockout.
• Para Western blotting, se espera una banda alrededor de 68 kDa. Las modificaciones postraduccionales, como la fosforilación o ubiquitinación, pueden causar desplazamientos de banda; optimice los controles de carga y los reactivos de detección.
• En IHC-P, los pasos de recuperación de antígeno y bloqueo son críticos. Use tejidos de control positivo como hígado o riñón, que expresan niveles altos de NRF2.
• Para IF/ICC, se deben optimizar las condiciones de permeabilización y fijación; la translocación nuclear de NRF2 bajo estrés oxidativo se puede evaluar comparando células tratadas y no tratadas.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir el emparejamiento con un anticuerpo secundario adecuado o el uso del anticuerpo como parte de un par sándwich; valide con proteína recombinante o lisados celulares.

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