Anticuerpo policlonal de conejo Anti-NSF para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P46459

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de NSF

• Identidad proteica: NSF (proteína de fusión sensible a N-etilmaleimida), también conocida como ATPasa de fusión de vesículas, SKD2 o SEC18, es un miembro de la familia de las ATPasas AAA codificada por el gen NSF (ID de gen: 4905).
• Función principal: Esta proteína es esencial para el transporte mediado por vesículas, cataliza la fusión de las vesículas de transporte dentro de las cisternas del Golgi y facilita el transporte desde el retículo endoplásmico hasta la pila de Golgi.
• Entrega de carga: NSF actúa como una proteína de fusión necesaria para entregar proteínas de carga a todos los compartimentos del Golgi, independientemente del origen de la vesícula, lo que garantiza un tráfico intracelular adecuado.
• Interacción con AMPAR: NSF interactúa con la subunidad del receptor AMPA GRIA2, influyendo en su ciclado de membrana y modulando por ello la plasticidad sináptica (Por similitud).
• Localización subcelular: La proteína reside predominantemente en el citoplasma, lo que coincide con su papel en los eventos de fusión de membrana.
• Propiedades clave y asociaciones a enfermedades: NSF presenta actividad de unión a ATP e hidrolasa, requiere magnesio como cofactor y sufre procesos de fosforilación y acetilación. Las mutaciones en NSF están ligadas a la encefalopatía epiléptica del desarrollo (DEE96) y a la discapacidad intelectual.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra un fragmento recombinante que comprende los aminoácidos 251-400 de NSF humana, una región dentro del dominio D2 de la ATPasa. Esto proporciona especificidad para la proteína nativa.
• Western Blotting: Para WB, se puede esperar una banda alrededor de 83 kDa correspondiente a NSF endógena. Optimice las condiciones de bloqueo y detección para su tipo de muestra (lisados de humano, ratón o rata).
• Inmunofluorescencia/Inmunocitoquímica: En IF/ICC, NSF debe mostrar tinción citoplasmática. Se requiere permeabilización; utilice métodos de fijación adecuados para preservar los epitopos.
• Inmunoprecipitación: La naturaleza policlonal permite la captura eficiente de complejos nativos de NSF. Valide la eficiencia de IP en su sistema y considere la reticulación si es necesario.
• ELISA: El anticuerpo se puede utilizar como reactivo de captura o detección; realice titulaciones en tablero de ajedrez para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y detección.
• Consideraciones generales: Como anticuerpo policlonal de conejo, reconoce múltiples epitopos, lo que reduce el riesgo de pérdida de señal por enmascaramiento de un solo epitopo. Incluya siempre controles positivos y negativos específicos para sus condiciones experimentales.

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