Anticuerpo Policlonal Anti-NSUN2 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q08J23

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NSUN2

• NSUN2, también conocido como MISU, MRT5, SAKI o TRM4, es una ARN citosina C(5)-metiltransferasa que cataliza la formación de 5-metilcitosina (m5C) en varias especies de ARN, incluidos tARN, mARN y ARN no codificantes largos. Referencias relacionadas: PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• Metila residuos de citosina específicos en precursores de tARN: posiciones 34 y 48 del tARN(Leu)(CAA) que contiene intrones y posiciones 48–50 del tARN(Gly)(GCC), una modificación esencial para la estabilidad del tARN y la generación de fragmentos derivados de tARN. Referencias relacionadas: PMID:17071714 PMID:22995836 PMID:31199786
• En los mARN, la metilación m5C mediada por NSUN2 recluta la proteína YBX1, que se une a los transcritos modificados y los protege de la degradación, mejorando así la estabilidad del mARN. Referencias relacionadas: PMID:22395603 PMID:31358969 PMID:34556860
• Las modificaciones m5C en el mARN también facilitan la exportación nuclear mediante el reconocimiento por la proteína adaptadora ALYREF/THOC4, vinculando la metilación con el tráfico nucleo-citoplasmático de los transcritos. Referencias relacionadas: PMID:28418038
• NSUN2 metila ARN de bóveda no codificantes (vtARN), como VTRNA1.1, promoviendo su procesamiento en pequeños ARN reguladores (svRNA4) que controlan la diferenciación epidérmica. Referencias relacionadas: PMID:23871666 PMID:31186410
• También dirige los tARN mitocondriales para la C5-metilación, extendiendo su papel regulador a la expresión génica mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:31276587
• A nivel subcelular, NSUN2 se encuentra en el nucléolo, nucleoplasma, citoplasma, mitocondrias y el huso mitótico, y es secretado a través de exosomas, lo que refleja sus diversos compartimentos funcionales.
• Expresado en el cerebro adulto y fetal y en células linfoblastoides, NSUN2 se asocia con procesos clave como el ciclo celular, la diferenciación y la espermatogénesis; las mutaciones están vinculadas a la discapacidad intelectual.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para la transferencia Western (Western blotting), considere cargar 20–50 µg de lisado de proteína total; la banda endógena de NSUN2 aparece aproximadamente a 86 kDa. Optimice el bloqueo y la dilución del anticuerpo primario para su muestra.
• En inmunohistoquímica (secciones de parafina), se recomienda la recuperación de antígenos inducida por calor (p. ej., tampón de citrato, pH 6.0); titule el anticuerpo para lograr una tinción específica.
• Para inmunofluorescencia, pruebe la fijación con paraformaldehído al 4% y la permeabilización con Triton X-100 al 0,1%. Incluya los controles apropiados para confirmar la localización.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con NSUN2 de ratón y rata según los datos del proveedor; valide la especificidad en la especie y tejido de interés utilizando modelos de knockout o knockdown.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 617–708 (región C-terminal); tenga en cuenta que el suero policlonal puede reconocer múltiples isoformas o productos de degradación.
• Para aplicaciones de ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo, e incluya pozos de control negativo para evaluar el fondo.

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