Anticuerpo Policlonico Anti-NUDT16 para WB, ELISA - Q96DE0

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NUDT16

• NUDT16 es una enzima multifuncional, anotada como enzima descapante del U8 snoRNA, también conocida como IDP fosfatasa (IDPasa), nudix hidrolasa 16 y proteína de unión al U8 snoRNA H29K.
• En su función como enzima descapante de ARN, NUDT16 cataliza la escisión dependiente de metales de la estructura de tapa del U8 snoRNA y los ARNm, esencial para la maduración del ARNr y el recambio de ARNm. Referencias relacionadas: PMID:20385596, PMID:26121039
• La enzima también funciona como desinfectante de nucleótidos, hidrolizando nucleótidos de purina no canónicos (IDP, dITP, GDP, dGDP, XDP, ITP, dITP) a sus formas monofosfato, con preferencia de sustrato IDP > dIDP >> GDP = dGDP > XDP = ITP = dITP, evitando así su incorporación en los ácidos nucleicos. Referencias relacionadas: PMID:20385596
• NUDT16 se localiza en múltiples compartimentos, incluyendo el núcleo, nucleoplasma, nucleolo y citoplasma, lo que refleja sus diversas funciones en el procesamiento de ARN y el metabolismo de nucleótidos.
• La proteína se expresa ampliamente, con niveles más altos en pulmón, riñón, glándula suprarrenal, testículo, corazón y cerebro.
• NUDT16 requiere iones metálicos divalentes como manganeso o cobalto para su actividad catalítica y se une fuertemente a GTP, ITP y XTP.
• Más allá de las estructuras de tapa canónicas, NUDT16 presenta actividad descapante hacia ARN con tapa de NAD y FAD, y según informes, hacia ARN con tapa de dpCoA. Referencias relacionadas: PMID:32432673

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno se dirige a los aminoácidos 60–130 dentro del dominio Nudix de NUDT16 humano. Esta región presenta una alta conservación entre humanos y ratones, lo que concuerda con los datos de reactividad cruzada.
• Para la detección por Western blot, utilice cantidades moderadas de lisado total de células de líneas celulares humanas o de ratón (por ejemplo, 20–30 µg), y realice la detección con protocolos quimioluminiscentes estándar. Se espera una banda cerca de los 21 kDa.
• En aplicaciones de ELISA, el anticuerpo puede servir como reactivo de captura o detección. Se recomienda optimizar la concentración de recubrimiento y el sistema de detección emparejado.
• Debido a que NUDT16 es una proteína de baja abundancia en algunos tipos celulares, el enriquecimiento de fracciones nucleares o el uso de reactivos de detección más sensibles pueden mejorar la señal.
• Para estudios funcionales, tenga en cuenta que NUDT16 se une a ARN e iones metálicos; el anticuerpo probablemente reconoce NUDT16 total independientemente de su estado de unión.

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