Anticuerpo Monoclonal Anti-NUDT5 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9UKK9

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de NUDT5

• NUDT5 es una enzima de doble función: en ausencia de difosfato, actúa como una pirofosfatasa de azúcar ADP, hidrolizando varios difosfatos de nucleósidos modificados; en presencia de difosfato, cataliza la síntesis de ATP. Referencias relacionadas: PMID:27257257
• Como pirofosfatasa de azúcar ADP, NUDT5 hidroliza sustratos como ADP-ribosa, ADP-manosa, ADP-glucosa, 8-oxo-GDP y 8-oxo-dGDP con eficiencias similares. Referencias relacionadas: PMID:10567213, PMID:10722730, PMID:17052728
• En el núcleo, NUDT5 media la síntesis de ATP convirtiendo ADP-ribosa en ATP y ribosa 5-fosfato, una reacción dependiente de su desfosforilación en Thr-45. Referencias relacionadas: PMID:27257257
• La generación de ATP nuclear por parte de NUDT5 es crítica para los eventos de remodelación de la cromatina que consumen energía. Referencias relacionadas: PMID:27257257
• NUDT5 exhibe actividad de decapado in vitro sobre ARN con cubierta de UDP-GlcNAc, escindiendo el puente pirofosfato de la cubierta de azúcar. Referencias relacionadas: PMID:38716860
• NUDT5 se une al ARN snoRNA U8 pero no lo decapa, lo que sugiere un papel en el metabolismo del ARN más allá de sus actividades enzimáticas.
• La proteína se localiza en el núcleo y se expresa ampliamente, con los niveles más altos en el hígado.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-100), se espera que el anticuerpo reconozca NUDT5 de longitud completa y potencialmente cualquier isoforma que contenga esta región; valide siempre en su sistema celular o de tejido.
• Para Western blot, se utiliza comúnmente una dilución inicial de 1:1000 para anticuerpos monoclonales, pero se recomienda la optimización mediante una serie de diluciones.
• En inmunofluorescencia/ICC, se requiere la permeabilización con Triton X-100 o un detergente similar para acceder al NUDT5 nuclear; la fijación con metanol también puede ayudar a preservar la antigenicidad.
• La preadsorción con el péptido inmunizante puede servir como control de especificidad tanto en WB como en IF/ICC.
• Se ha informado reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, la alineación de secuencias de la región N-terminal puede ayudar a predecir la reactividad con otras especies.
• Para ELISA, se sugiere un recubrimiento directo con antígeno y la titulación del anticuerpo; considere el uso de proteína NUDT5 recombinante para las curvas estándar.

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