Anticuerpo policlonal de conejo anti-NUMA1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14980

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de NUMA1

• La proteína 1 del aparato mitótico nuclear (NUMA1), también conocida como NuMA, NMP-22 o antígeno SP-H, es una proteína grande de 238 kDa con estructura de hélice enrollada, codificada por el gen NUMA1. Es un componente principal de la matriz nuclear.
• NUMA1 desempeña un papel fundamental en la formación y el mantenimiento de los polos del huso durante la mitosis al anclar los extremos negativos de los microtúbulos, garantizando así la correcta alineación y segregación de los cromosomas.
  Referencias relacionadas: PMID:11956313 PMID:12445386
• Participa en la orientación y elongación del huso mitótico mediante mecanismos dependientes de dineína-dinactina, interactuando con complejos corticales que contienen GPSM2 y proteínas Gα, así como con fosfoinosítidos como PI(4,5)P2.
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• NUMA1 también es necesaria para el ensamblaje de ásteres de microtúbulos mitóticos y la formación del huso anastral, regulando positivamente la localización de TNKS en los polos del huso.
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• Más allá de la mitosis, NUMA1 es una proteína de la matriz nuclear muy abundante que ocupa la mayor parte del volumen nuclear, lo que sugiere una función estructural. Es esencial para la diferenciación epidérmica y la morfogénesis de los folículos pilosos.
• Su localización subcelular incluye el núcleo, el nucleoplasma, la matriz nuclear, los polos del huso, los centrosomas, la corteza celular y la membrana celular lateral, lo que refleja sus funciones dinámicas tanto en la interfase como en la mitosis.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, ADP-ribosilación, fosforilación y ubiquitinación, según la anotación de UniProt (enlace isopeptídico, conjugación de Ubl, glicoproteína, lipoproteína), las cuales pueden regular sus funciones.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Dado el elevado peso molecular de NUMA1 (aproximadamente 238 kDa), para el análisis mediante Western blot se recomienda utilizar un gel de poliacrilamida de bajo porcentaje (por ejemplo, 6-8 %) y tiempos de transferencia prolongados para garantizar una transferencia eficaz.
• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aminoácidos 1-309) de NUMA1 humano; verifique que esta región no esté oculta por modificaciones postraduccionales o proteínas asociadas en sus muestras.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), NUMA1 presenta localización nuclear en células en interfase y localización en los polos del huso en células mitóticas; optimice las condiciones de fijación y permeabilización para preservar la antigenicidad.
• En inmunohistoquímica (IHC), pueden ser necesarios métodos de recuperación antigénica para tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina; valide los patrones de tinción comparándolos con las localizaciones subcelulares conocidas.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, puede producirse variabilidad entre lotes; incluya controles positivos y negativos adecuados en cada experimento.

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