Anticuerpo monoclonal anti-OGT para WB, ELISA, ChIP - O15294

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la OGT

• La OGT (UDP-N-acetilglucosamina--péptido N-acetilglucosaminiltransferasa subunidad de 110 kDa) es la subunidad catalítica del complejo O-GlcNAc transferasa, responsable de añadir una única N-acetilglucosamina (O-GlcNAc) a los residuos de serina/treonina de proteínas nucleares y citoplasmáticas (PubMed:12150998, PubMed:15361863, PubMed:19451179). Referencias relacionadas: PMID:12150998, PMID:15361863, PMID:19451179
• Glicosila una amplia gama de sustratos, incluyendo histona H2B, AKT1, AMPK, EZH2, MAPT/TAU y muchos otros, regulando así procesos clave como la transcripción, la señalización de la insulina, la autofagia y los ritmos circadianos (PubMed:19451179, PubMed:20200153, PubMed:21285374). Referencias relacionadas: PMID:19451179, PMID:20200153, PMID:21285374
• La OGT existe en múltiples isoformas, incluida una isoforma mitocondrial (mOGT) que es citotóxica y promueve la apoptosis, particularmente en células de insulinoma. También posee una actividad de N-acetilglucosaminiltransferasa especializada con una preferencia de sustrato distinta (PubMed:31527085). Referencias relacionadas: PMID:31527085
• La enzima se localiza en el núcleo, el citoplasma, las mitocondrias y la membrana celular, lo que refleja sus diversos roles funcionales.
• Las modificaciones postraduccionales de la OGT incluyen la acetilación y la fosforilación, y participa en las vías de conjugación de ubiquitina. Las palabras clave también destacan su participación en la apoptosis, los ritmos biológicos, la regulación de la cromatina y las interacciones huésped-virus.
• La OGT se expresa altamente en el páncreas, con niveles moderados en el músculo esquelético, corazón, cerebro y placenta, y cantidades traza en pulmón e hígado, lo que concuerda con su papel en la señalización de la insulina y la homeostasis de la glucosa.

Guía experimental y consejos técnicos

• El péptido inmunógeno corresponde a los residuos 947–1046 de la OGT humana, una región probablemente expuesta en la proteína nativa; considere usar este anticuerpo para Western blot desnaturalizante donde el epítopo sea accesible.
• Para ensayos de ChIP, valide las condiciones de entrecruzamiento y la especificidad del anticuerpo con controles positivos y negativos adecuados, dada la asociación de la OGT con la cromatina.
• En Western blot, el peso molecular predicho es de ~117 kDa; sin embargo, múltiples isoformas y extensas modificaciones postraduccionales pueden resultar en bandas adicionales o desplazamientos; incluya marcadores de peso molecular adecuados.
• Al trabajar con muestras de roedores, confirme la reactividad en tejidos de ratón o rata, ya que el anticuerpo muestra reactividad cruzada; se recomienda la optimización de la dilución y las condiciones de bloqueo.

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