Anticuerpo policlonal de conejo Anti-OTUB1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q96FW1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de OTUB1

• OTUB1 es una enzima desubiquitinizante que hidroliza específicamente cadenas de poliubiquitina unidas a 'Lys-48', desempeñando un papel fundamental en el recambio y degradación de proteínas (PubMed:12401499, 12704427, 14661020). Referencias relacionadas: PMID:12401499 PMID:12704427 PMID:14661020
• El gen codifica dos isoformas mediante empalme alternativo: la isoforma 1 (ubícua) desestabiliza RNF128 para prevenir la anergia de linfocitos T, mientras que la isoforma 2 (específica de tejidos linfoides) estabiliza RNF128 y promueve la anergia (PubMed:14661020). Referencias relacionadas: PMID:14661020
• Además de su actividad catalítica, OTUB1 actúa de forma no catalítica en la reparación de daños del ADN al unirse a ubiquitina libre e inhibir UBE2N/UBC13, limitando así la ubiquitinación de histonas mediada por RNF168 unida a 'Lys‑63' (PubMed:20725033, 22325355). Referencias relacionadas: PMID:20725033 PMID:22325355
• OTUB1 desubiquitina el receptor alfa de estrógeno (ESR1) y puede eliminar conjugados de NEDD8, aunque con menor eficiencia que la ubiquitina unida a 'Lys‑48' (PubMed:19383985, 18954305, 23827681). Referencias relacionadas: PMID:19383985 PMID:18954305 PMID:23827681
• La fosforilación en Tyr‑26 regula la actividad de mTORC1 al mediar la desubiquitinación no catalítica de RPTOR, mientras que la desubiquitinación dependiente de aminoácidos de DEPTOR puede inhibir mTORC1 y mTORC2 (PubMed:29382726, 35927303). Referencias relacionadas: PMID:29382726 PMID:35927303
• Su localización subcelular es predominantemente citoplasmática.
• La isoforma 1 se expresa de forma ubicua, mientras que la isoforma 2 se limita a tejidos linfoides (amígdalas, ganglios linfáticos, bazo) y a células mononucleares de sangre periférica.
• OTUB1 pertenece a la familia de dominios OTU de las tiol proteasas y se clasifica como hidrolasa; participa en vías de inmunidad, reparación del ADN y conjugación de ubiquitina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno cubre la región N-terminal (aa 1‑220) de la OTUB1 humana, que incluye el dominio OTU; la reactividad cruzada observada con ratón y rata sugiere que esta región está conservada.
• Para western blot, espere una banda cerca de los 31 kDa; utilice controles positivos adecuados (por ejemplo, lisados de HeLa o Jurkat) y considere el silenciamiento por siARN para confirmar la especificidad.
• En inmunofluorescencia/CCI, realice una fijación y permeabilización estándar; espere patrones de tinción citoplasmáticos.
• Para aplicaciones de ELISA, optimice la concentración del antígeno de recubrimiento y las diluciones del anticuerpo; la combinación con un anticuerpo de detección puede facilitar el desarrollo de ensayos sandwich.
• Aunque se ha demostrado que el anticuerpo reacciona con muestras de humano, ratón y rata, verifique siempre su rendimiento en su sistema experimental específico.

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