Anticuerpo policlonal de conejo Anti-OTUD4 para WB, IF/ICC, ELISA - Q01804

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de OTUD4

• OTUD4, también conocida como proteína HIN-1 inducida por VIH-1, es una desubiquitinasa que hidroliza el enlace isopéptido entre la ubiquitina y los residuos de lisina de las proteínas diana (PubMed:23827681, PubMed:25944111, PubMed:29395066).
  Referencias relacionadas: PMID:23827681 PMID:25944111 PMID:29395066
• Tras la fosforilación en Ser-202 y Ser-204, OTUD4 desubiquitina específicamente la proteína adaptadora MYD88 poliubiquitinada en Lys-63 a través de las vías del receptor de IL-1 y del receptor Toll-like, atenuando la transcripción inflamatoria dependiente de NF-kB (PubMed:29395066).
  Referencias relacionadas: PMID:29395066
• Con independencia de su actividad catalítica, OTUD4 actúa como andamio para ensamblar las desubiquitinasas USP7 y USP9X, estabilizando la enzima de reparación de alquilación ALKBH3 y promoviendo la reparación de lesiones de ADN alquiladas (PubMed:25944111).
  Referencias relacionadas: PMID:25944111
• La proteína se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo, lo que coincide con su papel en la señalización inmune y la reparación del ADN.
• OTUD4 sufre modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación (al menos en Ser-202/Ser-204) y acetilación, y está sujeta a empalme alternativo.
• La proteína de longitud completa tiene un peso molecular calculado de aproximadamente 124 kDa (UniProt Q01804).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 200-500 de la OTUD4 humana, una región central que puede detectar OTUD4 endógena en múltiples formatos de aplicación.
• Para transferencia Western, la proteína OTUD4 de longitud completa corre a aproximadamente 124 kDa; se recomienda un gel de SDS-PAGE al 6-8% y condiciones de transferencia adecuadas.
• Para inmunofluorescencia/ICC, OTUD4 presenta localización tanto citoplasmática como nuclear; las condiciones de permeabilización deben optimizarse para detectar las fracciones nucleares.
• Los experimentos de ELISA se pueden realizar con el inmunógeno recombinante o lisados celulares; se recomienda validar con un control positivo conocido.
• Se espera reactividad cruzada con OTUD4 de humano, ratón y rata según la homología de secuencia; sin embargo, el rendimiento en cada especie debe confirmarse experimentalmente.
• Como anticuerpo policlonal, debe verificarse la consistencia entre lotes, y es recomendable incluir controles positivos y negativos adecuados en todos los ensayos.

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