Anticuerpo policlonal de conejo anti-OX40L para WB, IF/ICC, ELISA - P23510

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de OX40L (TNFSF4)

• OX40L, también conocido como TNFSF4, CD252 y glicoproteína Gp34, es un miembro de la superfamilia de ligandos del factor de necrosis tumoral (TNF) y funciona como una molécula coestimuladora clave en las respuestas inmunitarias.
• Codifica una proteína transmembrana de tipo II expresada principalmente en células presentadoras de antígenos (APC) activadas, incluidos los linfocitos B, las células dendríticas y los macrófagos.
• OX40L se une específicamente a su receptor, TNFRSF4 (OX40), en los linfocitos T activados, desencadenando señales coestimuladoras que aumentan la proliferación, supervivencia y producción de citocinas efectoras de las células T.
• La proteína se localiza en la membrana celular mediante una secuencia de anclaje-señal N-terminal, con el dominio de homología con TNF C-terminal orientado hacia el espacio extracelular, lo que permite la trimerización y la interacción con el receptor.
• Las modificaciones postraduccionales, incluida la glucosilación y la formación de enlaces disulfuro, son fundamentales para la estabilidad estructural y la bioactividad.
• El corte y empalme alternativo genera múltiples isoformas, y los polimorfismos genéticos en el gen TNFSF4 se han asociado con la susceptibilidad al lupus eritematoso sistémico (LES) y a otros trastornos autoinmunitarios.
• El dominio extracelular (aproximadamente los aminoácidos 51-183) utilizado para la inmunización corresponde a la región de unión al receptor, lo que garantiza que el anticuerpo se dirija a la parte funcional de la molécula.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca el dominio extracelular predicho (aa 51-183), por lo que el anticuerpo debería reconocer tanto la forma unida a la membrana como cualquier fragmento soluble desprendido de OX40L.
• Para la transferencia Western, el peso molecular teórico es de aproximadamente 21 kDa; sin embargo, la glucosilación puede provocar un cambio en la migración. Se recomiendan condiciones reductoras; valide el resultado con controles positivos adecuados.
• En inmunofluorescencia/ICC, es posible que sea necesario optimizar los protocolos de fijación y permeabilización, ya que el epítopo es extracelular, pero podría verse afectado por la reticulación. Pruebe condiciones permeabilizadas y no permeabilizadas.
• La reactividad cruzada descrita con OX40L de ratón permite su uso en modelos murinos; verifique el rendimiento en su sistema experimental específico.
• Para aplicaciones de ELISA, considere combinar este anticuerpo policlonal con un socio adecuado de captura/detección para desarrollar un ensayo sándwich robusto.

CamelBio: su plataforma integral de abastecimiento

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