Anticuerpo policlonal anti-p38 MAPK para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q16539

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de p38 MAPK

• La proteína quinasa 14 activada por mitógenos (MAPK14), conocida comúnmente como p38 alfa, es una serina/treonina quinasa activada por el estrés que pertenece a la familia de las quinasas MAP. Existe en múltiples isoformas, incluidas EXIP y MXI2, generadas mediante corte y empalme alternativo.

• Tras su activación por señales extracelulares como citocinas proinflamatorias o estrés físico, p38 fosforila las quinasas posteriores MSK1/2, que luego regulan factores de transcripción (CREB1, NF-κB, STAT) y la histona H3 (PubMed:9687510, PubMed:9792677). También activa MK2/3 para controlar la estabilidad del ARNm mediante ZFP36 y ELAVL1, y MNK1/2 para fosforilar EIF4E2 durante el inicio de la traducción (PubMed:11154262). Referencias relacionadas: PMID:9687510 PMID:9792677 PMID:11154262

• p38 regula la renovación de proteínas mediante la fosforilación de la ubiquitina ligasa SIAH2 (PubMed:17003045) y del inhibidor de la apoptosis CFLAR, y puede inhibir la autofagia al interferir con el tráfico de ATG9 (PubMed:19893488). Referencias relacionadas: PMID:17003045 PMID:19893488

• En la dinámica de los receptores, p38 impulsa la internalización de EGFR mediada por clatrina mediante la fosforilación del propio EGFR y de los efectores de RAB5A (PubMed:16932740), y promueve la liberación del ectodominio de los ligandos de la familia de TGF-α al activar la metaloproteasa ADAM17 (PubMed:20188673). Referencias relacionadas: PMID:16932740 PMID:20188673

• La p38 nuclear fosforila directamente factores de transcripción, incluidos ATF1, ATF2, ATF6, ELK1, TP53/p53 y MEF2A/C (PubMed:10330143, PubMed:9430721, PubMed:9858528), y mejora la accesibilidad de NF-κB en los promotores de genes inflamatorios al aumentar la fosforilación de la histona H3 en Ser-10. Referencias relacionadas: PMID:10330143 PMID:9430721 PMID:9858528

• p38 contribuye a la regulación del ciclo celular mediante la fosforilación de CDC25B/C, lo que provoca un retraso en G2 después de la radiación ultravioleta (PubMed:11333986). También es esencial para la eritropoyesis durante el desarrollo y la inducida por estrés mediante la regulación de la expresión del gen EPO (PubMed:10943842). Referencias relacionadas: PMID:11333986 PMID:10943842

• Durante una infección, EsxA de M. tuberculosis puede activar p38 en las células T, lo que da lugar a la inhibición de la producción de IFN-γ (PubMed:21586573). Referencias relacionadas: PMID:21586573

• p38 se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo. Se expresa ampliamente, con niveles más altos en el cerebro, el corazón, la placenta, el páncreas y el músculo esquelético, y niveles más bajos en el pulmón, el hígado y el riñón. Entre sus modificaciones postraduccionales se incluyen la acetilación y la ubiquitinación, y ha sido identificada en estudios proteómicos.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 261–360 de p38 humana) está conservado en humanos, ratones y ratas, lo que concuerda con la reactividad cruzada del anticuerpo. Verifique mediante alineamiento de secuencias antes de extender su uso a otras especies.
• Para Western blot, utilice condiciones desnaturalizantes y reductoras, y un intervalo inicial de dilución del anticuerpo de 1:500–1:2000; optimice con controles positivos adecuados (por ejemplo, HeLa y Jurkat).
• Para IHC-P, puede ser necesaria la recuperación antigénica (por ejemplo, con tampón de citrato, pH 6,0); valide la especificidad de la tinción mediante un péptido bloqueante o controles con tejido knockout.
• Para IF/ICC, fije con PFA al 4 % y permeabilice con Triton X-100 al 0,1 %; realice una tinción conjunta con marcadores nucleares/citoplasmáticos.
• Para IP, utilice 1–2 µg de anticuerpo por cada 500 µg de lisado de proteínas y capture con perlas de proteína A/G.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse como reactivo de captura o de detección; pruebe su combinación con un anticuerpo monoclonal compatible.

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