Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-p38 MAPK para WB, IF/ICC, ELISA - Q16539

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de p38 MAPK (MAPK14)

• MAPK14 es una serina/treonina quinasa que sirve como componente central de la vía de la quinasa MAPK p38. Activada por citoquinas proinflamatorias y diversos estresores, regula una extensa red de sustratos aguas abajo (estimados en 200-300 objetivos) para controlar diversos procesos celulares, incluida la expresión génica, la estabilidad del mRNA, la traducción y el recambio proteico.
• A través de la fosforilación de las quinasas aguas abajo MSK1/2 y MAPKAPK2/3/MNK1/2, MAPK14 orquesta la regulación transcripcional y postranscripcional. MSK1/2 activan factores de transcripción (CREB1, ATF1, NF-κB, STAT1/3) y fosforilan directamente la histona H3 y HMGN1 para promover la remodelación de la cromatina y la inducción de genes de respuesta inmediata. MAPKAPK2/3 controlan la estabilidad del mRNA mediante ZFP36 y ELAVL1, mientras que MNK1/2 modulan la traducción a través de la fosforilación de eIF4E2. Referencias relacionadas: PMID:9687510, PMID:9792677, PMID:11154262
• MAPK14 fosforila directamente una serie de factores de transcripción, incluidos TP53/p53 (en cooperación con la caseína quinasa II), ATF1, ATF2, ELK1 y MEF2C/MEF2A, vinculando las señales de estrés con la reprogramación transcripcional. Referencias relacionadas: PMID:10747897, PMID:10330143, PMID:9430721, PMID:9858528
• La quinasa regula la degradación de proteínas y la dinámica de los receptores de membrana. Fosforila CFLAR para promover la degradación proteasómica, controla la actividad de la ligasa de ubiquitina SIAH2 e interfiere con el tráfico de ATG9 para modular la autofagia. Además, MAPK14 fosforila el EGFR y los efectores de RAB5A para regular la endocitosis mediada por clatrina, y activa la eliminación del dominio extracelular de los ligandos del EGFR impulsada por ADAM17. Referencias relacionadas: PMID:17003045, PMID:19893488, PMID:16932740, PMID:20188673
• MAPK14 participa en los puntos de control del ciclo celular y las respuestas al daño en el ADN. Fosforila CDC25B y CDC25C, permitiendo la unión de 14-3-3 e iniciando un retraso en G2 después de la radiación UV. Ante el daño en el ADN, fosforila TIAR, lo que libera a TIAR del mRNA de GADD45A y evita la degradación del transcrito. Referencias relacionadas: PMID:11333986, PMID:20932473
• Esencial para el crecimiento de los vasos sanguíneos en el laberinto placentario y la eritropoyesis inducida por estrés a través de la regulación de la expresión del gen EPO. MAPK14 también desencadena la activación del inflamasoma NLRP1 aguas abajo de colisiones de ribosomas, lo que conduce a piroptosis. Además, durante la infección por M. tuberculosis, la EsxA bacteriana fosforila MAPK14 para suprimir la producción de IFN-γ en las células T. Referencias relacionadas: PMID:10943842, PMID:35857590, PMID:21586573
• MAPK14 se expresa en una amplia gama de tejidos, con los niveles más altos en cerebro, corazón, placenta, páncreas y músculo esquelético; se observa una menor expresión en pulmón, hígado y riñón. Se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo. El empalme alternativo produce isoformas como MXI2 (actividad de quinasa reducida) y EXIP (proapoptótica). La proteína sufre múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas fosforilación, acetilación y conjugación tipo ubiquitina.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (péptido sintético que se asigna a los aminoácidos 100-200) se encuentra dentro de una región conservada; por lo tanto, se espera reactividad cruzada con MAPK14 de ratón y rata. Valide la reactividad en lisados de células o tejidos específicos de la especie relevante antes del uso rutinario.
• Para el western blot, considere el uso de extractos de células enteras de células estresadas frente a células en reposo para observar cambios de banda específicos de fosforilación. Incluya siempre los controles apropiados (p. ej., anticuerpos anti-fosfo-p38, inhibidores de quinasas) para garantizar la especificidad de la señal.
• En inmunofluorescencia/ICC, optimice las condiciones de fijación/permeabilización y confirme los patrones de tinción consistentes con la distribución citoplasmática y nuclear. Se recomienda la tinción simultánea con marcadores de compartimentos.
• Para ELISA, utilice la proteína recombinante humana MAPK14 como estándar y valide la linealidad de la detección. Combine este anticuerpo con un anticuerpo de detección adecuado para desarrollar un ELISA sándwich sensible.
• Dado que MAPK14 exhibe funciones independientes de la quinasa y múltiples isoformas, verifique que su resultado experimental refleje el papel específico que pretende estudiar.

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