Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-P4HA1 para WB, IF/ICC, ELISA - P13674

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de P4HA1

• La subunidad alfa-1 de la prolil 4-hidroxilasa (P4HA1), también conocida como subunidad alfa-1 de la prolil-proteína colágena, 2-oxoglutarato 4-dioxigenasa, es una subunidad catalítica del complejo enzimático de la prolil 4-hidroxilasa del colágeno.
• Cataliza la formación postraduccional de 4-hidroxiprolina en secuencias -Xaa-Pro-Gly- en colágenos y otras proteínas, esencial para la estabilidad de la triple hélice del colágeno.
• P4HA1 se localiza en la luz del retículo endoplasmático, donde modifica las cadenas de procolágeno nacientes durante la biosíntesis.
• La proteína se expresa en múltiples tejidos, incluidos el corazón, el hígado, el músculo esquelético, el riñón, la placenta, el pulmón y el páncreas.
• Como una dioxigenasa, P4HA1 requiere hierro y vitamina C como cofactores y es miembro de la familia de oxigenasas dependientes de 2-oxoglutarato.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación, y el gen sufre empalme alternativo, generando potencialmente múltiples isoformas.
• Palabras clave: estructura 3D, empalme alternativo, dioxigenasa, retículo endoplasmático, glicoproteína, hierro, unión a metales, oxidorreductasa, identificación por proteómica, proteómica de referencia, señal, repetición TPR, vitamina C.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 235-534 del P4HA1 humano. La especificidad del anticuerpo puede confirmarse mediante ELISA de competencia con péptidos o Western blot utilizando la proteína P4HA1 recombinante.
• Para Western blot, el peso molecular predicho es de ~61 kDa; valide con lisados de control positivo de líneas celulares humanas, de ratón o de rata que expresen P4HA1.
• En inmunofluorescencia/ICC, se espera que P4HA1 se localice en el retículo endoplasmático; use tinción simultánea apropiada (por ejemplo, marcadores del RE) para confirmar.
• Para ELISA, considere un formato directo o sándwich y titule el anticuerpo para una señal óptima con el péptido inmunizante o la proteína de longitud completa.
• El rendimiento del anticuerpo puede variar según la aplicación; se recomiendan estudios piloto con controles positivos/negativos conocidos.

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