Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-P4HB para WB, IHC-P, ELISA - P07237

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de P4HB

• La proteína disulfuro-isomerasa (P4HB) es una enzima multifuncional y chaperona del retículo endoplasmático, también conocida como PDI, PDIA1 y subunidad beta de la prolil 4-hidroxilasa.
• Cataliza la formación, ruptura y reordenamiento de los enlaces disulfuro en proteínas nacientes, garantizando un plegamiento correcto de las proteínas en la luz del RE.
• En la superficie celular, actúa como una reductasa que escinde enlaces disulfuro de proteínas exofaciales, modulando la estructura y función de las proteínas de superficie celular. Referencias relacionadas: PMID:21670307
• Tras la fosforilación por FAM20C, altas concentraciones de P4HB funcionan como una chaperona que inhibe la agregación de proteínas mal plegadas, mientras que bajas concentraciones promueven la agregación (actividad anti-chaperona). Referencias relacionadas: PMID:32149426
• Sirve como subunidad estructural del complejo prolil 4-hidroxilasa y de la proteína microsomal de transferencia de triacilgliceroles MTTP.
• La localización subcelular incluye la luz del retículo endoplasmático, melanosomas y la membrana celular; también se secreta a la superficie celular donde interactúa con LGALS9.
• Palabras clave y asociaciones con enfermedades: las mutaciones en P4HB están relacionadas con la craneosinostosis y la osteogénesis imperfecta; las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido C-terminal (aa 409-508) del P4HB humano; la accesibilidad del epítopo puede verse influida por el plegamiento de la proteína o las interacciones.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda alrededor de 57 kDa. Utilice controles de carga apropiados y valide la especificidad del anticuerpo utilizando muestras de knockdown o knockout.
• En inmunohistoquímica (IHC-P), los métodos de recuperación de antígenos (p. ej., recuperación de epítopos inducida por calor en tampón de citrato, pH 6,0) pueden mejorar la señal. Optimice la concentración del anticuerpo primario y las condiciones de incubación.
• Para ELISA, considere emparejar este anticuerpo monoclonal con un anticuerpo policlonal de captura o detección para ensayos sándwich; valide en la matriz de muestras relevante.
• Se informa reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, verifique la homología de secuencia de la región del inmunógeno entre especies para confirmar la unión si utiliza muestras no humanas.
• Almacene el anticuerpo según lo recomendado (el envío en bolsa de hielo indica requisito de cadena de frío); evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.

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