PolimAb® anti-P4HB de conejo para WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P07237

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de P4HB (Proteína disulfuro isomerasa)

• El gen P4HB codifica la proteína disulfuro isomerasa (PDI), también conocida como PDIA1, ERBA2L y otros alias. Se trata de una enzima multifuncional perteneciente a la familia de las proteínas disulfuro isomerasas.
• La PDI cataliza la formación, ruptura y reordenamiento de los enlaces disulfuro. En la superficie celular, actúa como una reductasa que rompe los enlaces disulfuro de las proteínas unidas, pudiendo modificar proteínas exofaciales. En el interior celular, garantiza la formación correcta de enlaces disulfuro en las proteínas nacientes.
• En concentraciones elevadas y tras la fosforilación por FAM20C, la PDI actúa como una chaperona que inhibe la agregación de proteínas mal plegadas. Por el contrario, en concentraciones bajas, facilita la agregación (actividad anti-chaperona). Referencias relacionadas: PMID:32149426
• La PDI actúa como subunidad estructural de la prolil 4-hidroxilasa y de la proteína transferasa de triacilgliceroles microsomal MTTP, contribuyendo a la síntesis de colágeno y al metabolismo lipídico.
• Funciona como receptor de LGALS9 en las células T helper Th2, una interacción que retiene a P4HB en la superficie celular, aumenta la actividad disulfuro reductasa, altera el estado redox de la membrana plasmática y promueve la migración celular. Referencias relacionadas: PMID:21670307
• La localización subcelular incluye el lumen del retículo endoplásmico, los melanosomas y la membrana celular, lo que refleja sus diversas funciones en el plegamiento de proteínas, la secreción y la regulación redox de la superficie celular.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación; contiene un centro redox activo con enlaces disulfuro y comparte características estructurales como los dominios de tipo tiorredoxina.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 329–508 (región C-terminal) de la P4HB humana, lo que puede conferir especificidad hacia la PDI y reducir la reactividad cruzada con otros miembros de la familia de las disulfuro isomerasas.
• Para Western blot (WB), se espera una banda de aproximadamente 57 kDa. Valide el anticuerpo en su sistema de muestra específico, ya que las modificaciones postraduccionales pueden causar cambios menores en la movilidad electroforética.
• En inmunoprecipitación (IP) e inmunofluorescencia (IF/ICC), puede reconocerse la conformación nativa de la proteína; optimice las condiciones de lisis y fijación para preservar los epítopos.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), considere métodos adecuados de recuperación de antígeno, ya que el epítopo se encuentra en un dominio estructurado.
• Se ha descrito que el anticuerpo presenta reactividad cruzada con la P4HB de ratón y rata, pero se recomienda su validación en la especie/tejido deseado.

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