Anticuerpo monoclonal de conejo anti-p53 para WB, IP, ELISA - P04637

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de p53

• p53, también conocida como antígeno tumoral celular p53, fosfoproteína p53 y supresor tumoral p53, está codificada por el gen TP53. Existen múltiples isoformas (por ejemplo, la isoforma 2 aumenta la actividad de transactivación, la isoforma 4 suprime la transactivación y la isoforma 7 inhibe la apoptosis) con propiedades funcionales distintas.
• Actúa como un factor de transcripción multifuncional que induce la detención del ciclo celular, la reparación del ADN o la apoptosis al unirse a su secuencia de ADN diana, funcionando como supresor tumoral en muchos tipos de tumores.
  Referencias relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• La inducción de la apoptosis está mediada en parte por la estimulación de la expresión del antígeno BAX y FAS, o por la represión de la expresión de Bcl‑2; su actividad proapoptótica se regula mediante interacciones con proteínas de la familia ASPP.
  Referencias relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• La localización subcelular incluye el núcleo, el citoplasma, las mitocondrias, el retículo endoplásmico y el centrosoma, lo que permite un trasiego dinámico en respuesta a señales de estrés celular.
• Sufre modificaciones postraduccionales extensas que incluyen fosforilación, acetilación, metilación y ubiquitinación, que modulan su estabilidad y actividad transcripcional.
• Regula el reloj circadiano al reprimir la activación transcripcional mediada por CLOCK‑BMAL1 del PER2.
  Referencias relacionadas: PMID:24051492
• Se expresa de forma ubicua en todos los tejidos normales con patrones dependientes de la isoforma; por ejemplo, la isoforma 2 está ausente en el cerebro, pulmón y próstata, mientras que la isoforma 8 solo se detecta en colon, médula ósea, testículo, cerebro fetal e intestino.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende una proteína de fusión recombinante que cubre los aminoácidos 1–393 de la p53 humana (NP_000537.3), que incluye casi toda la secuencia de longitud completa; este diseño puede conferir reconocimiento de epitopes en múltiples dominios funcionales, por lo que es adecuado para aplicaciones como Western blotting, inmunoprecipitación y ELISA.
• Como anticuerpo monoclonal validado por KO, se espera que presente una alta especificidad; considere utilizar un lisado celular con p53 eliminado (knockout) como control negativo en Western blotting para confirmar la identidad de la banda diana.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho es de 44 kDa, pero las modificaciones postraduccionales y las variaciones de isoforma pueden dar lugar a múltiples bandas o un ligero desplazamiento; optimice las cantidades de carga y los tiempos de exposición en consecuencia.
• Para inmunoprecipitación, utilice protocolos estandarizados e incluya un anticuerpo de control de isotipo para evaluar la unión no específica.
• En ELISA, combine este anticuerpo con un anticuerpo de detección adecuado siguiendo los procedimientos estándar; valídelo en la matriz de muestra correspondiente para garantizar su rendimiento.

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