Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PAF1 para WB, IHC-P y ELISA - Q8N7H5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PAF1

• Componente principal del complejo PAF1 (PAF1C), que regula la elongación de la transcripción por la ARN polimerasa II, las modificaciones de histonas y la formación del extremo 3' del ARNm.
• PAF1C se asocia con el CTD de la ARN polimerasa II tanto en estados no fosforilados como fosforilados, facilitando el acoplamiento entre la transcripción y los procesos cotranscripcionales.
• Promueve la monoubiquitinación de la histona H2B K120 (H2BK120ub1) mediante el reclutamiento del complejo de ubiquitina ligasa RNF20/40, y estimula la metilación H3K4me3; estas modificaciones son fundamentales para la transcripción activa.
• Es necesario para la transcripción de los genes diana de Hox y Wnt, y desempeña un papel en la hematopoyesis y la leucemogénesis mediante interacciones con oncoproteínas de fusión KMT2A/MLL1.
• Se localiza en el núcleo, en consonancia con sus funciones reguladoras de la transcripción.
• Presenta actividad oncogénica; está implicado en las vías de corte y empalme alternativo, fosforilación y conjugación de ubiquitina.
• Durante la infección por influenza A (H3N2), interactúa con la proteína viral NS1 para modular la transcripción de genes del huésped.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético de la región N-terminal (aa 1-100) de PAF1 humano, por lo que el anticuerpo puede detectar la proteína de longitud completa y determinadas isoformas. Verifique la especificidad de la isoforma en su sistema experimental.
• Para Western blot, se espera una banda cercana a 60 kDa en condiciones reductoras; incluya controles positivos, como lisados de células HeLa o HEK293.
• La tinción mediante IHC-P debería mostrar localización nuclear; optimice la recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo utilizando controles de tejido positivo adecuados.
• En ELISA, el inmunógeno peptídico puede utilizarse como estándar. La reactividad cruzada con PAF1 de ratón y rata permite su aplicación en estas especies; confirme el rendimiento en las muestras de la especie correspondiente.
• Considere realizar ensayos de co-inmunoprecipitación o ChIP si el anticuerpo funciona en el análisis de complejos proteicos nativos, pero valide dichas aplicaciones de forma independiente.

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