Anticuerpo monoclonal de conejo Anti-PAK3 para WB, IHC-P, ELISA - O75914

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PAK3

• PAK3 es una serina/treonina proteína quinasa perteneciente a la familia de quinasas activadas por p21 (PAK).
• Actúa como efector descendiente de las GTPasas pequeñas CDC42 y RAC1, regulando la dinámica del citoesqueleto, la migración celular y la progresión del ciclo celular.
• En neuronas, PAK3 cumple un papel fundamental en la morfogénesis de las espinas dendríticas, la formación de sinapsis y la plasticidad sináptica, en parte mediante la fosforilación de la cadena ligera reguladora de la miosina II (MLC) para controlar la contractilidad de la actomiosina.
• PAK3 se expresa en altos niveles en el sistema nervioso, específicamente en las neuronas postmitóticas de la corteza cerebral e hipocampo en desarrollo y postnatal.
• La quinasa se activa al unirse a CDC42/RAC1 activos, lo que genera un cambio conformacional y autofosforilación en múltiples residuos de serina/treonina.
• PAK3 fosforila dianas descendientes como MAPK4, MAPK6 y TNNI3/troponina I, lo que lo vincula a la polimerización de F-actina mediada por MAPKAPK5 y la contractilidad del músculo cardíaco.
• Subcelularmente, PAK3 se localiza predominantemente en el citoplasma.
• El splicing alternativo genera múltiples isoformas; las mutaciones en PAK3 están asociadas a la discapacidad intelectual ligada al cromosoma X.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a la región N-terminal (aa 1-100) de PAK3 humano, lo que sugiere que el anticuerpo probablemente reconoce un epítopo dentro de este dominio, que puede estar conservado en ratón y rata.
• Para Western blot (WB), la banda predicha es de ~62 kDa; se recomienda utilizar tejido neuronal o lisados celulares (por ejemplo, cerebro, hipocampo) como controles positivos.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), se recomiendan secciones de cerebro embebidas en parafina; se deben optimizar los métodos adecuados de recuperación de antígeno.
• El ELISA se puede realizar con el péptido inmunógeno o la proteína PAK3 recombinante; se debe evaluar la reactividad cruzada con miembros relacionados de la familia PAK.
• Dado que PAK3 se expresa tanto en el sistema nervioso en desarrollo como en el adulto, puede ser necesaria una validación específica por etapa del desarrollo.
• Incluya siempre controles negativos adecuados (por ejemplo, líneas celulares knockout o tejidos) para confirmar la especificidad.

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