Anticuerpo policlonal de conejo anti-PAK3 para WB, IF/ICC, ELISA - O75914

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PAK3

• PAK3 (proteína serina/treonina quinasa PAK 3) es un miembro de la familia de quinasas activadas por p21 (PAK) y se expresa predominantemente en neuronas posmitóticas de la corteza cerebral y el hipocampo (UniProt O75914, ESPECIFICIDAD TISULAR).
• Funciona como efector posterior de las pequeñas GTPasas CDC42 y RAC1, y desempeña un papel clave en la regulación del citoesqueleto, la migración celular y la regulación del ciclo celular (FUNCIÓN).
• PAK3 es fundamental para la morfogénesis de las espinas dendríticas, la formación de sinapsis y la plasticidad sináptica; en las neuronas del hipocampo, es necesaria para la formación de espinas dendríticas y sinapsis excitadoras (FUNCIÓN, ESPECIFICIDAD TISULAR).
• Tras su activación por CDC42/RAC1, PAK3 experimenta un cambio conformacional y una autofosforilación en residuos de serina/treonina; posteriormente fosforila dianas como MAPK4, MAPK6, MAPKAPK5 y TNNI3/troponina I para regular la polimerización de la actina y la sensibilidad al calcio (FUNCIÓN).
• Entre los sustratos adicionales se incluye la cadena ligera reguladora de la miosina II (MLC), lo que vincula la actividad quinasa de PAK3 con la contractilidad actomiosínica en las espinas dendríticas (FUNCIÓN, por similitud).
• La proteína se localiza en el citoplasma (LOCALIZACIÓN SUBCELULAR) y contiene un dominio de unión a SH3 y un dominio similar a la ubiquitina (PALABRAS CLAVE: unión a SH3, conjugación de Ubl).
• PAK3 está asociada con la discapacidad intelectual ligada al cromosoma X (MRX30, MRX47, XLID30), y sus formas variantes están vinculadas a enfermedades (PALABRAS CLAVE: variante patológica, discapacidad intelectual).

Orientación experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo se generó contra un péptido sintético de la región N-terminal (aa 1-100) de PAK3 humana (isoforma NP_001121638.1). Esta región puede estar presente en múltiples isoformas; la especificidad debe verificarse utilizando controles específicos de isoforma.
• Para Western blot, el peso molecular esperado de PAK3 de longitud completa es de aproximadamente 62 kDa; prepare lisados de líneas celulares neuronales o tejidos cerebrales relevantes e incluya controles positivos y negativos adecuados.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), considere probar múltiples protocolos de fijación/permeabilización y diluciones del anticuerpo para optimizar la detección de PAK3 endógena, que es citoplasmática.
• Las aplicaciones de ELISA pueden utilizarse para determinar el título del anticuerpo mediante el péptido inmunizante o una proteína recombinante; se ha informado de reactividad cruzada con proteínas de ratón y rata, pero se recomienda la validación en el sistema de ensayo específico.
• Al tratarse de un anticuerpo policlonal, la uniformidad entre lotes puede variar; se recomienda realizar pruebas preliminares con su configuración experimental.

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