Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-PARN para WB, IF/ICC, ELISA - O95453

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PARN

• PARN (Ribonucleasa específica de poli(A)) es una 3'-exorribonucleasa con fuerte preferencia por las colas de poli(A) de los ARNm, iniciando la degradación de ARNm dependiente de deadenilación. Referencias relacionadas: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• Interacciona tanto con la cola 3'-poli(A) como con la estructura de capuchón 5', un acoplamiento esencial para una deadenilación eficiente. Referencias relacionadas: PMID:10882133 PMID:11359775 PMID:12748283
• PARN participa en la degradación de ARNm mediada por mutaciones sin sentido (NMD) y en la degradación de ARNm inestables que contienen ARE, posiblemente a través de la interacción con KHSRP. Referencias relacionadas: PMID:10882133
• Además de los ARNm, PARN puede recortar las colas de poli(A) de microARNs (p. ej., MIR21) y snoRNAs de caja H/ACA, influyendo en su estabilidad. Referencias relacionadas: PMID:22442037 PMID:25049417
• La proteína se localiza en el núcleo, citoplasma y nucleolo, reflejando sus múltiples funciones en el metabolismo del ARN.
• PARN se expresa de forma ubicua en tejidos humanos y pertenece a la familia de nucleasas deadenilantes; requiere magnesio como cofactor.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación y fosforilación, y el empalme alternativo genera múltiples isoformas.
• Las mutaciones en PARN se asocian con la disqueratosis congénita, vinculándola con trastornos de la biología de los telómeros.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno abarca los 280 aminoácidos N-terminales; considere la accesibilidad del epítopo en el diseño de su ensayo. Para WB, se sugiere un rango de dilución inicial de 1:500–1:2000 con un anticuerpo secundario adecuado, con optimización basada en el nivel de expresión de su muestra.
• En IF/ICC, las condiciones de fijación y permeabilización (p. ej., metanol vs. PFA/Triton) pueden influir en la detección del antígeno; valide en su línea celular de interés. La distribución nuclear/citoplásmica de PARN puede requerir controles de co-tinción cuidadosos.
• Para ELISA, la naturaleza policlonal puede mejorar la captura de la señal; considere emparejarlo con un anticuerpo monoclonal para un ELISA tipo sándwich. Valide con proteína recombinante o lisados celulares que expresen PARN humano.
• El peso molecular predicho es ~73 kDa; confirme ejecutando marcadores de peso molecular apropiados y considere posibles desplazamientos dependientes de la isoforma.

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