Anticuerpo policlonal anti-PARP1 para WB, IF/ICC, ELISA - P09874

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PARP1

• PARP1 es una enzima nuclear altamente conservada que cataliza la transferencia de ADP-ribosa desde NAD+ a proteínas diana, desempeñando un papel fundamental en la reparación de roturas de cadena sencilla del ADN mediante la vía de reparación por escisión de bases (BER). Referencias relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• También participa en la reparación de roturas de doble cadena mediante recombinación homóloga, promoviendo el reclutamiento de factores de reparación en los sitios de daño. Referencias relacionadas: PMID:26344098, PMID:30356214
• En respuesta al daño del ADN, PARP1 media la ADP-ribosilación de serina de las histonas, facilitando la descompactación de la cromatina y el acceso de los factores de reparación; esta actividad depende de su cofactor HPF1. Referencias relacionadas: PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:32028527
• Más allá de la reparación del ADN, PARP1 actúa como regulador transcripcional, reprimiendo o activando la transcripción mediante la modulación de la estructura de la cromatina o de los factores de elongación. Referencias relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882
• PARP1 es un mediador clave de la parthanatos, una vía de muerte celular independiente de las caspasas; durante la apoptosis, la escisión de PARP1 por las caspasas-3/7 genera un fragmento que se transloca al citoplasma y desencadena la muerte celular mediada por AIFM1. Referencias relacionadas: PMID:33168626
• La proteína se localiza predominantemente en el núcleo y los cromosomas, con presencia adicional en el nucléolo; también puede desplazarse al citoplasma en determinadas condiciones.
• PARP1 experimenta amplias modificaciones postraduccionales, especialmente auto-poli-ADP-ribosilación, que regula su actividad; también contiene múltiples motivos de dedos de zinc fundamentales para la unión al ADN.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (aa 81-390) se encuentra en el dominio de unión al ADN; verifique que el anticuerpo reconozca tanto PARP1 de longitud completa como PARP1 escindido si estudia la apoptosis.
• En Western blot, PARP1 tiene un peso molecular previsto de aproximadamente 113 kDa; utilice condiciones de transferencia adecuadas para proteínas grandes.
• En IF/ICC, asegure una fijación y permeabilización adecuadas para detectar PARP1 nuclear; realice una tinción simultánea con un marcador de daño del ADN para confirmar la localización.
• Para ELISA, ajuste la concentración del anticuerpo y utilice agentes de bloqueo adecuados para minimizar el fondo.
• La consistencia entre lotes debe validarse, ya que se trata de un anticuerpo policlonal.

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