Anticuerpo Policlonal Anti-PARP1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09874

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PARP1

• PARP1 es una enzima nuclear que cataliza la poli(ADP-ribosil)ación de proteínas diana, desempeñando un papel central en la reparación del ADN, el mantenimiento del genoma y la muerte celular. Referencias relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Como sensor de daño al ADN, PARP1 se une a roturas simples y dobles de la cadena y, junto con HPF1, cataliza la ADP-ribosilación de serina en histonas y otras proteínas de cromatina para promover la relajación de la cromatina y el reclutamiento de factores de reparación. Referencias relacionadas: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625, PMID:28190768, PMID:29954836
• PARP1 también puede mediar la ADP-ribosilación de glutamato/aspartato a través de la interacción con NMNAT1, y la ADP-ribosilación de tirosina con HPF1, demostrando especificidad de residuo dependiente de cofactor. Referencias relacionadas: PMID:25043379, PMID:28190768, PMID:29954836, PMID:30257210
• Más allá de la reparación, PARP1 funciona como regulador transcripcional, actuando tanto como represor (mediante la modificación de la estructura de la cromatina) como factor de elongación positivo o negativo dependiendo del contexto. Referencias relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• PARP1 participa en vías de muerte celular programada: su proteína de longitud completa participa en la parthanatos, mientras que la escisión dependiente de caspasa genera un fragmento de 89 kDa que promueve la apoptosis mediada por AIFM1. Referencias relacionadas: PMID:33168626
• Subcelularmente, PARP1 se localiza principalmente en el núcleo y el nucléolo, pero puede translocarse al citoplasma o unirse a los cromosomas, especialmente durante el daño al ADN o la apoptosis.
• PARP1 contiene múltiples dominios de dedos de zinc para la unión al ADN y un dominio catalítico, y su actividad está regulada por modificaciones postraduccionales que incluyen la auto-ADP-ribosilación, acetilación y fosforilación.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde al dominio catalítico C-terminal (aa 662-1014). Por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer tanto la PARP1 de longitud completa (~113 kDa) como el fragmento C-terminal escindido por caspasa (~89 kDa) en WB. Para estudios de apoptosis, considere usar inductores apropiados y validar los patrones de escisión.
• En IHC-P, se espera una tinción predominantemente nuclear; sin embargo, pueden aparecer señales citoplasmáticas o nucleolares dependiendo del estado celular o el procesamiento del tejido. Incluya siempre controles positivos (por ejemplo, células en proliferación) y negativos.
• Para IF/ICC, los protocolos de permeabilización y fijación deben optimizarse, ya que PARP1 está fuertemente unido a la cromatina. La fijación con Tritón X-100 o metanol puede ser útil.
• Las aplicaciones de ELISA pueden requerir la titulación del anticuerpo; se pueden usar antígenos recombinantes o lisados celulares.

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