Anticuerpo Policlonico de Conejo Anti-PCSK9 para WB, IF/ICC, ELISA - Q80W65

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PCSK9

• La proproteína convertasa subtlisina/kexina tipo 9 (PCSK9), también conocida como NARC-1 o PC9, es una serina proteasa secretada que pertenece a la familia de las proproteínas convertasas. Se sintetiza como zimógeno y sufre escisión autocatalítica en el retículo endoplásmico.
• PCSK9 es un regulador crucial de la homeostasis del colesterol plasmático al unirse a miembros de la familia de receptores de lipoproteínas de baja densidad (LDLR, VLDLR, LRP1, LRP8) y promover su degradación intracelular, reduciendo así la captación de colesterol LDL.
• Aumenta la degradación hepática de LDLR por una vía dependiente de clatrina, probablemente al evitar el reciclaje de LDLR de los endosomas a la superficie celular o dirigirlo a los lisosomas, y también puede inducir la ubiquitinación de LDLR.
• Más allá de LDLR, PCSK9 inhibe la degradación intracelular de la apolipoproteína B (APOB) a través de una vía de autofagosoma/lisosoma independiente de LDLR y participa en la eliminación de intermediarios no acetilados de BACE1 en la vía secretora temprana.
• PCSK9 modula la absorción de Na+ mediada por el canal epitelial de sodio (ENaC) al disminuir su expresión en superficie mediante una degradación proteasomal aumentada, y regula la apoptosis neuronal a través de la señalización antiapoptótica dependiente de LRP8/APOER2.
• A nivel subcelular, PCSK9 se localiza en el citoplasma, es secretado y se asocia con endosomas, lisosomas, superficie celular, retículo endoplásmico y aparato de Golgi, lo que refleja su tráfico y diversidad funcional.
• La expresión tisular es destacada en hepatocitos, células mesenquimales renales, epitelios del íleon intestinal y colon, y neuronas del telencéfalo del cerebro embrionario.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 35–694 de PCSK9 de ratón, que abarcan el dominio catalítico y la región C-terminal; el anticuerpo puede reconocer tanto la forma pro larga completa (~74 kDa) como la forma madura escindida. Se recomienda validar las bandas detectadas con controles adecuados.
• Para Western blotting, utilice SDS-PAGE reductor y espere una banda principal cerca de los 74 kDa en lisados de hígado de ratón o hepatocitos; el anticuerpo reacciona de forma cruzada con humano y rata, pero confirme la reactividad en su especie objetivo.
• En experimentos de IF/ICC, PCSK9 muestra una distribución citoplasmática punteada y perinuclear consistente con los compartimentos de RE, Golgi y endosomas. Se requiere permeabilización; optimice la fijación y la dilución del anticuerpo para su tipo celular.
• Para aplicaciones de ELISA, el anticuerpo se puede usar como reactivo de captura o detección para medir PCSK9 en sobrenadantes celulares o fluidos biológicos. Valide las condiciones del ensayo con estándares de PCSK9 recombinante.

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