Anticuerpo Policlonal Anti-PENK para WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01210

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Proencefalina-A

• La Proencefalina-A (PENK) es una proteína precursora que se procesa proteolíticamente para generar varios péptidos opioides activos, incluyendo Met-encefalina y Leu-encefalina, que son críticos para modular la percepción del dolor y las respuestas al estrés.
• Las encefalinas codificadas actúan como ligandos endógenos de los receptores opioides, imitando los efectos de los fármacos opiáceos y desempeñando papeles clave en la analgesia, la recompensa y la regulación del estrés.
• Uno de sus productos de escisión, Met-encefalina-Arg-Phe, actúa como un fuerte agonista del receptor opioide tipo Mu (OPRM1) en el núcleo accumbens, conduciendo a una depresión sináptica a largo plazo de la liberación de glutamato.
• Los péptidos derivados de PENK también ejercen efectos no opioides al unirse al receptor MRGPRX1, induciendo sensaciones de picor y nociceptivas independientes de la histamina en neuronas sensoriales. Referencias relacionadas: PMID:11850634 PMID:28223516 PMID:21593341
• Subcelularmente, la proencefalina-A se localiza en el lumen de vesículas secretoras, como los gránulos cromafines, y se secreta tras la estimulación, en consonancia con su papel como neuropéptido.
• La proteína contiene características estructurales que incluyen un péptido señal, múltiples sitios de escisión en residuos básicos apareados y un enlace disulfuro, que son esenciales para su procesamiento y secreción.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 25–267 de la proencefalina-A humana, abarcando la mayor parte de la proteína precursora. Este anticuerpo policlonal puede reconocer tanto el precursor de longitud completa como sus fragmentos procesados.
• Para Western blot (WB), el peso molecular predicho del precursor de longitud completa es de 31 kDa; sin embargo, debido al procesamiento postraduccional, pueden observarse múltiples bandas correspondientes a péptidos que contienen encefalina. Se recomienda optimizar el porcentaje de gel y los controles de carga.
• En inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF-P), deben validarse métodos de fijación apropiados (p. ej., PFA al 4%) y de recuperación antigénica para el tejido diana, ya que los antígenos de neuropéptidos pueden ser sensibles a la sobrefijación.
• La reactividad cruzada con ratón y rata permite estudios translacionales en estas especies, pero se recomienda la validación de la especificidad del anticuerpo mediante controles de knockout o péptido bloqueante específicos de especie.
• Para ELISA, puede ser necesario emparejarlo con un anticuerpo de detección compatible. Los experimentos de titulación deben determinar las concentraciones óptimas de anticuerpo de recubrimiento y de detección.

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