Anticuerpo policlonal de conejo anti-PENK para WB, IF-P y ELISA - P01210

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de la proencefalina-A (PENK)

• La proencefalina-A (PENK) es una proteína precursora que se somete a procesamiento proteolítico para producir péptidos opioides activos, entre ellos la metencefalina, la leuencefalina y la metencefalina-Arg-Phe.
• Las encefalinas actúan como ligandos endógenos de los receptores opioides e imitan los efectos de los fármacos opiáceos, modulando así la percepción del dolor, las respuestas al estrés y la dinámica de los neurotransmisores.
• La metencefalina-Arg-Phe se une al receptor opioide de tipo mu OPRM1 en el núcleo accumbens para inducir una depresión sináptica a largo plazo de la liberación de glutamato, contribuyendo a los mecanismos de recompensa y analgesia.
• Más allá de la señalización opioide clásica, los péptidos derivados de PENK también actúan como ligandos del receptor MRGPRX1, desencadenando prurito y sensaciones nociceptivas independientes de la histamina (PubMed:11850634, PubMed:28223516). Referencias relacionadas: PMID:11850634, PMID:28223516
• La activación de MRGPRX1 en las neuronas sensoriales periféricas provoca prurito y rascado, mientras que la señalización central de MRGPRX1 alivia el dolor crónico, lo que revela una función dual (PubMed:11850634, PubMed:21593341, PubMed:28223516). Referencias relacionadas: PMID:11850634, PMID:21593341, PMID:28223516
• A nivel subcelular, la PENK se localiza en vesículas secretoras citoplasmáticas, especialmente en los gránulos cromafines, y se secreta al espacio extracelular.
• La proteína experimenta modificaciones postraduccionales clave, incluida la formación de enlaces disulfuro y la fosforilación, que pueden influir en su procesamiento y en las interacciones con los receptores.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 150-267 de la PENK humana, lo que abarca la región C-terminal que contiene el motivo peptídico opioide Met-encefalina-Arg-Phe; se espera que el anticuerpo policlonal resultante reconozca tanto la proencefalina-A de longitud completa como los fragmentos procesados que contengan este epítopo.
• Para Western blot (WB), el peso molecular previsto de la proencefalina-A es de aproximadamente 31 kDa; sin embargo, pueden observarse múltiples bandas debido al procesamiento proteolítico y a posibles modificaciones postraduccionales, por lo que se recomienda optimizar la preparación de las muestras.
• En la inmunofluorescencia (IF-P), dado que la PENK es una proteína secretada localizada en vesículas secretoras, las condiciones de permeabilización y fijación son críticas para visualizar los reservorios intracelulares; valide el patrón de tinción en modelos celulares o tisulares adecuados.
• Este anticuerpo presenta reactividad cruzada con la PENK de rata, lo que facilita los estudios en modelos de roedores; no obstante, se recomienda realizar una validación específica para cada especie.
• Al ser un anticuerpo policlonal, el rendimiento puede variar entre lotes; realice siempre una titulación e incluya controles adecuados para cada experimento.

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