Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Perforina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P14222

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Perforina-1

• Perforina-1 (PRF1) es una proteína formadora de poros crucial para la vía de muerte celular programada mediada por granzimas, que dirige su acción a células infectadas por virus y neoplásicas. Referencias relacionadas: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045
• Tras la unión al calcio, la perforina se inserta en las membranas de las células diana, oligomeriza y crea poros grandes, permitiendo la entrada de granzimas citotóxicas que desencadenan la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:20889983 PMID:21037563 PMID:24558045 PMID:20038786 PMID:20225066
• Transporta preferentemente proteínas catiónicas, como las granzimas, mientras que las proteínas neutras o aniónicas se translocan de forma ineficiente a través de sus poros. Referencias relacionadas: PMID:24558045
• La perforina también desempeña un papel clave en la vigilancia inmune, contribuyendo a la eliminación de células no propias durante el rechazo de trasplantes y en enfermedades autoinmunes. Referencias relacionadas: PMID:9058810
• Los poros de perforina median la liberación extracelular de caspase-7 madura (CASP7), amplificando aún más la muerte celular programada.
• A nivel subcelular, la perforina se almacena en los gránulos citolíticos de los linfocitos T citotóxicos y las células NK, se secreta tras la interacción con la célula diana y puede localizarse en la membrana celular y la luz del endosoma.
• La proteína contiene un dominio similar al EGF, está N-glicosilada y requiere calcio para su actividad; las mutaciones en PRF1 están relacionadas con la linfohistiocitosis hemofagocítica familiar (FHL).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 280-555 de la perforina humana, que incluye el dominio de complejo de ataque a membrana/perforina (MACPF), por lo que permite detectar tanto la proteína de longitud completa como posibles productos de escisión.
• Para transferencia western, el peso molecular predicho es de aproximadamente 61 kDa; sin embargo, modificaciones postraduccionales como la glicosilación pueden alterar la migración. Valide el tamaño de la banda en el sistema de muestra correspondiente.
• La inmunohistoquímica y la inmunofluorescencia pueden requerir la optimización de las condiciones de fijación y permeabilización para exponer los epítopos en los gránulos citolíticos.
• Este anticuerpo presenta una amplia reactividad cruzada con ratón y rata, por lo que es adecuado para estudios entre especies; no obstante, confirme la reactividad en su sistema modelo.

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