Anticuerpo policlonal anti-PGP9.5/UCHL1 para WB, ELISA - P09936

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PGP9.5/UCHL1

• PGP9.5/UCHL1, también conocida como proteína citoplasmática neuronal 9.5 o ubiquitina tioesterasa L1, es un miembro de la familia de las hidrolasas de carboxilo-terminal de ubiquitina, que funciona como una desubiquitinasa esencial para mantener el sistema ubiquitina-proteasoma.

• Reconoce e hidroliza específicamente la glicina del carboxilo-terminal de la ubiquitina, preservando así un pool estable de monoubiquitina libre que es crítica tanto para las vías de degradación por ubiquitina-proteasoma como por autofagia-lisosoma.
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• UCHL1 participa en diversos procesos fisiológicos, incluido el mantenimiento de la función sináptica, la función cardíaca, la regulación de las respuestas inflamatorias y la osteoclastogénesis.
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• La enzima desubiquitina y estabiliza múltiples proteínas sustrato como WWTR1/TAZ, EGFR, HIF1A y BACE1, modulando así las vías de señalización involucradas en el crecimiento celular, la respuesta a la hipoxia y la neurodegeneración.
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• A través de su acción sobre BACE1, UCHL1 promueve la degradación de la enzima beta-secretasa que escinde la proteína precursora de amiloide 1, lo que conduce a una reducción en la producción de péptidos beta-amiloide, un sello distintivo de la patología de la enfermedad de Alzheimer.
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• A nivel subcelular, UCHL1 se localiza predominantemente en el citoplasma y también se encuentra asociada a la membrana del retículo endoplásmico.

• La expresión tisular es más alta en las neuronas, detectándose la proteína en los cuerpos celulares y procesos a lo largo de la neocorteza; también está presente en células del sistema neuroendocrino difuso y sus tumores, pero solo débilmente en el ovario. Cabe destacar que los niveles de UCHL1 están regulados a la baja en tejidos cerebrales de pacientes con enfermedad de Parkinson y enfermedad de Alzheimer.

• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación, oxidación y prenilación, y las variantes genéticas se han relacionado con paraplejía espástica hereditaria, enfermedad de Parkinson y otros trastornos neurodegenerativos.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la detección por Western blot, se espera una banda de aproximadamente 25 kDa; sin embargo, debido a posibles modificaciones postraduccionales y agregación proteica, el peso molecular observado puede variar.

• Los lisados de tejido cerebral humano o las líneas celulares de neuroblastoma (por ejemplo, SH-SY5Y) pueden servir como controles positivos dada la expresión neuronal de UCHL1; también se pueden utilizar muestras de cerebro de ratón para confirmar la reactividad cruzada.

• Las aplicaciones de ELISA deben considerar recubrir con el inmunógeno recombinante (aa 59-223) como estándar e incluir controles negativos apropiados para evaluar la especificidad.

• Dado que se trata de un anticuerpo policlonal generado contra una proteína de fusión recombinante, se debe verificar la consistencia entre lotes y los pasos de preadsorción pueden ayudar a reducir la unión inespecífica si es necesario.

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