Anticuerpo monoclonal anti-PHF8 para WB, ELISA - Q9UPP1

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de PHF8

• PHF8 (KDM7B/JHDM1F/ZNF422) es una histona lisina desmetilasa que elimina preferentemente las marcas mono y dimetiladas de H3K9 y H4K20, convirtiendo la cromatina represiva en un estado activo. Referencias relacionadas: PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• Es crucial para la progresión del ciclo celular al controlar la transición G1-S, y para la transcripción del ADN ribosomal como coactivador de la ARN polimerasa I. Referencias relacionadas: PMID:20622854, PMID:20531378
• Su actividad desmetilasa sobre H3K9me2 se ve fuertemente estimulada por la unión a H3K4 trimetilado (H3K4me3), lo que representa una lectura de cromatina activa. Referencias relacionadas: PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• PHF8 actúa en sinergia con el factor de transcripción ARX para upregular KDM5C, promoviendo el enriquecimiento de H3K4me3 en los elementos reguladores. Referencias relacionadas: PMID:31691806
• La proteína se localiza en el núcleo y el nucléolo, en línea con su función reguladora de la cromatina y el ADN ribosomal.
• Posee un dedo PHD que se une a H3K4me3, un dominio catalítico JmjC y un dominio de dedo de zinc (ZNF422), lo que lo clasifica como regulador de la cromatina.
• Es necesario para el desarrollo normal del cerebro; las mutaciones de pérdida de función están vinculadas a la discapacidad intelectual ligada al cromosoma X (MRXSSD).

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 800-900 de PHF8 humano, por lo que el anticuerpo probablemente reconozca la región C-terminal de la proteína.
• Para Western blot, PHF8 tiene un peso molecular aproximado de 118 kDa; asegúrese de utilizar el porcentaje de gel adecuado y condiciones de transferencia correctas para proteínas de alto peso molecular.
• Dada su localización nuclear, se recomienda la extracción nuclear o lisados totales de células para la detección; considere validar el ensayo en líneas celulares humanas y de ratón que expresen PHF8 (por ejemplo, HeLa, HEK293, fibroblastos embrionarios de ratón).
• Para ELISA, se puede utilizar el formato directo o sándwich; se recomienda optimizar la concentración del antígeno de recubrimiento y del anticuerpo.
• Al ser un modificador de histonas con expresión dependiente del ciclo celular, la intensidad de la señal puede variar; incluya controles de carga adecuados y normalice respecto al número de células o la proteína total.

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