Anticuerpo policlonal anti-PHLPP2 para WB, IF/ICC y ELISA - Q6ZVD8

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PHLPP2

• PHLPP2 (fosfatasa 2 que contiene un dominio PH y repeticiones ricas en leucina), también conocida como PHLPPL o PPM3B, es miembro de la familia de fosfatasas PHLPP que regulan la señalización de las quinasas AGC.
• Desfosforila residuos de serina clave en el motivo hidrofóbico de las quinasas AGC, incluidas Akt1 (Ser-473), PRKCB (Ser-660) y PRKCA (Ser-657), inactivando así estas quinasas y promoviendo la apoptosis o reduciendo la proliferación.
• PHLPP2 funciona como supresor tumoral y su expresión está regulada negativamente en muchos tipos de cáncer, incluido el cáncer colorrectal, donde se pierde en aproximadamente el 80 % de los tumores (a nivel proteico).
• Además, PHLPP2 desfosforila y activa STK4 (MST1) en Thr-387, lo que conduce a la apoptosis. Referencias relacionadas: PMID:20513427
• Desfosforila RPS6KB1 (S6K1), regulando la traducción dependiente de la caperuza. Referencias relacionadas: PMID:21986499
• PHLPP2 también desfosforila RAF1, inhibiendo su actividad quinasa y modulando así la vía MAPK/ERK. Referencias relacionadas: PMID:24530606
• A nivel subcelular, PHLPP2 se localiza en el citoplasma, la membrana y el núcleo, en consonancia con sus funciones en diversos compartimentos de señalización.
• La proteína contiene repeticiones ricas en leucina y un dominio PH, importantes para las interacciones proteína-proteína y la localización en la membrana.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a una región C-terminal (aminoácidos 1250-1323) de PHLPP2 humana; considere utilizar un péptido bloqueante para confirmar la especificidad del anticuerpo en los ensayos pertinentes.
• Para la transferencia Western (WB), el peso molecular previsto de PHLPP2 es de aproximadamente 147 kDa; utilice un porcentaje de gel adecuado (por ejemplo, SDS-PAGE al 6-8 %) y asegure unas condiciones de transferencia apropiadas para proteínas de alto peso molecular.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), PHLPP2 presenta localización citoplasmática, membranal y nuclear; optimice los protocolos de fijación y permeabilización para cada compartimento.
• Para ELISA, realice una titulación del anticuerpo frente al péptido inmunógeno o la proteína recombinante para determinar la concentración de trabajo óptima para la detección.

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