Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-Fosfo-AKT1 (Ser473) para WB, ELISA - P31749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

AntContexto Biológico: Función y Localización de AKT1

• AKT1 (proteína quinasa serina/treonina RAC-alfa, también conocida como PKBα) es una proteína quinasa serina/treonina perteneciente a la familia AKT, que en humanos comprende tres isoformas estrechamente relacionadas (AKT1, AKT2, AKT3) que controlan el metabolismo, la proliferación, la supervivencia, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136

• Funciona corriente abajo de PI3K y transduce señales de insulina, IGF1, EGF y PDGF; fosforila más de 100 objetivos corriente abajo, incluyendo GSK3, TSC2, factores de transcripción FOXO y componentes de la vía mTORC1, coordinando así el metabolismo de la glucosa, la síntesis de proteínas y la expresión génica. Referencias relacionadas: PMID:12176338, PMID:12964941, PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:21432781

• La fosforilación de TSC2 en Ser939 y Thr1462 por AKT1 alivia la inhibición de mTORC1, impulsando el crecimiento celular y la síntesis de proteínas; por el contrario, AKT1 fosforila e inhibe GSK3α/β para promover la síntesis de glucógeno y la progresión del ciclo celular. Referencias relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553

• AKT1 promueve la supervivencia celular fosforilando e inactivando proteínas pro-apoptóticas como BAD (Ser136) y MAP3K5/ASK1 (Ser83), y activando CREB1 para aumentar la expresión de BCL2 y MCL1 anti-apoptóticos. Referencias relacionadas: PMID:10926925, PMID:11154276, PMID:9829964

• Regula la dinámica del citoesqueleto y la migración celular fosforilando sustratos como paladina (PALLD) y SPATA13, influyendo en la renovación de la adhesión y la motilidad. Referencias relacionadas: PMID:20471940, PMID:19934221

• AKT1 se localiza en el citoplasma, el núcleo, la membrana plasmática y el espacio intermembranoso mitocondrial. Se expresa de forma ubicua, con niveles elevados de fosfo-Ser473 observados en cánceres de próstata y mama, vinculándolo a la señalización oncogénica.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El anticuerpo se genera contra un péptido sintético fosforilado correspondiente a los residuos que rodean a Ser473 de Akt1 humano; considere el uso de lisados tratados con fosfatasa o un anticuerpo no fosfo-AKT1 como control negativo para verificar la especificidad de la fosforilación.
• En WB, espere una sola banda a ~56 kDa; use controles positivos apropiados (por ejemplo, lisados de células estimuladas con insulina o EGF) y optimice las cantidades de carga y los tiempos de exposición.
• Para ELISA, el recubrimiento de la placa con péptido fosforilado y péptido no fosforilado puede ayudar a evaluar la unión específica a fosfo; incluya pasos de bloqueo y lavado para reducir el fondo inespecífico.
• Se indica reactividad cruzada para humano, ratón y rata; sin embargo, se recomienda la validación en la matriz de muestra relevante de cada especie.
• Dado que el anticuerpo reconoce la forma fosforilada de AKT1, también puede detectar otras isoformas de AKT (AKT2, AKT3) si el epítopo está conservado; confirme la especificidad con modelos de "knockdown" o "knockout" específicos de la isoforma si es necesario.

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