Anticuerpo Monoclonal de Conejo Anti-Fosfo-AKT1 (T450) para WB, ELISA - P31749

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de AKT1

• AKT1 es una serina/treonina proteína quinasa, una de las tres isoformas de AKT estrechamente relacionadas (AKT1, AKT2, AKT3), también conocida como Proteína Quinasa B (PKB), que regula diversos procesos celulares que incluyen el metabolismo, la proliferación, la supervivencia, el crecimiento y la angiogénesis. Referencias relacionadas: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 media la señalización corriente abajo de la fosfoinosítido 3-quinasa (PI3K) en respuesta a factores de crecimiento como la insulina, IGF1, EGF y PDGF, y fosforila una amplia gama de sustratos. Referencias relacionadas: PMID:12176338, PMID:12964941
• La fosforilación de TSC2 en Ser-939 y Thr-1462 por AKT1 conduce a la activación de la vía mTORC1, promoviendo la síntesis de proteínas y el crecimiento celular. Referencias relacionadas: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 regula la supervivencia celular fosforilando e inhibiendo factores pro-apoptóticos como MAP3K5 (ASK1) y BAD, y activando factores de transcripción de supervivencia como CREB1. Referencias relacionadas: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 regula el transporte de glucosa estimulado por insulina fosforilando TBC1D4, lo que desencadena la unión a proteínas 14-3-3 y facilita la translocación de GLUT4 a la superficie celular. Referencias relacionadas: PMID:11994271
• AKT1 se desplaza entre el citoplasma, el núcleo, la membrana celular y el espacio intermembranal mitocondrial, y la fosforilación en Thr450 (y otros sitios) influye en su activación y localización.
• La quinasa se expresa de manera ubicua en los tejidos humanos, con niveles aumentados de proteína y fosforilación observados en cánceres de próstata y mama, destacando su papel como protooncogén.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la fosforilación, la acetilación y la ubiquitinación, que modulan su actividad, estabilidad e interacciones.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido fosforilado sintético correspondiente a los residuos que rodean el Thr450 de AKT1 humana. Asegúrese de que sus condiciones experimentales preserven la fosforilación de las proteínas; considere el uso de inhibidores de fosfatasas durante la preparación de la muestra.
• Para la transferencia Western (Western blot, WB), el anticuerpo está diseñado para reconocer específicamente la AKT1 fosforilada en Thr450. Valide la especificidad de la señal usando lisados tratados con fosfatasa o un control de bloqueo con péptido no fosforilado si es necesario.
• El anticuerpo es adecuado para aplicaciones de ELISA. Considere optimizar las condiciones de recubrimiento y detección utilizando proteína AKT1 fosforilada purificada o péptido.
• Se ha demostrado reactividad cruzada con AKT1 humana y de rata. Verifique la reactividad con otras especies si se requiere, ya que AKT1 T450 está altamente conservada pero puede tener ligeras variaciones.
• D>Dado el papel de AKT1 en múltiples vías de señalización, use estímulos apropiados (p. ej., insulina, factores de crecimiento) para inducir la fosforilación en Thr450 en su modelo experimental.

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